赤色蛍光発光HIVとその感染細胞の生体内播種・感染拡大の分子イメージング動態解析

红色荧光HIV及其感染细胞体内传播和感染扩散的分子影像动力学分析

• 批准号: 22659189
• 负责人: 満屋 裕明
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22659189/
• 关键词: hNOJマウス; HIVmC; HIV初期感染動態; raltegravir; in vivo imaging法; possible sanctuary; 持続産生細胞

我々はこれ迄、ヒト末梢血単核球(hPBM)移植NOD/Scid/Jak3-/-(hNOJ)マウスに赤色蛍光蛋白(mCherry)を標識したHIV-1(HIV_mC)を経腹腔的に接種、HIV-1感染初期における感染細胞の生体内播種のダイナミックスを検討し、in vivo imaging法、免疫染色法を用いて腹腔の大網やリンパ節にHIV-1p24産生を伴ったmCherry蛍光を検出した。2010年度は観察されたHIV初期感染動態が、抗HIV薬であるraltegravir (RAL;インテグラーゼ阻害剤)の投与下でどのように変化するか検討した。hNOJマウスに経腹腔的にHIV_mCを感染させ、24時間後からRAL(40mg/kg/day,bid,ip)を投与、7、14日後にHIV_mC感染hNOJにおけるウイルス学的、蛍光分析的、組織学的、免疫学的解析を行った。RAL投与群と非投与群を比較すると、前者でHIV RNAコピー数の減少などを認めたが、いくつかの個体ではウイルス血症が完全に抑制されなかった。HIVのpossible sanctuaryを仔細に検討したところ、大網に有意のmCherry蛍光シグナルを、またそれに一致してHIV-1 p24産生が観察され、これら細胞の主たる分画は単球系であった。これらの知見から、早期に感染が確立した細胞はRAL投与に拘らずそのエリアに留まり、HIV-1持続産生細胞となる可能性が示唆された。本研究はHIV-1感染細胞の視覚化がhNOJマウスにおけるHIV-1感染初期ダイナミクスの解析に有用な手法であることを示し、また治療によって抑制できないウイルス播種の機構と持続感染細胞の動態を検討する有効な手段になると示した。今後は人で見られる経静脈・経直腸など他の感染経路での播種の態様を検討する予定である。

We have so far identified HIV-1(HIV_mC) by peripheral blood mononuclear cell (hPBM) transplantation NOD/Scid/Jak3-/-(hNOJ), and identified HIV-1p24 production by mCherry in vivo, in vivo imaging, and immunostaining. In 2010, we will review the dynamics of HIV infection in the early stages, and review the impact of raltegravir (RAL) on HIV resistance. HIV_mC infection in the abdominal cavity of hNOJ cells was detected at 24 hours after RAL administration (40mg/kg/day,bid,ip), 7 and 14 days after RAL administration. Compared with non-group, the former has reduced the number of HIV RNA, and the latter has completely suppressed HIV RNA. HIV-1 p24 is produced in a single cell system, which is the result of a careful study of HIV-1 possible sanctuaries. The possibility of HIV-1 production in cells that are infected early in life is demonstrated. The present study demonstrates useful methods for the analysis of HIV-1 infection in the early stages of its development, mechanisms for inhibiting HIV-1 seeding, and mechanisms for maintaining the dynamics of HIV-1 infected cells. In the future, we will discuss the status of planting in the vein, rectum and other infected channels.

项目成果

Novel protease inhibitors (PIs) containing macrocyclic components and 3(R),3a(S),6a(R)-bis-tetrahydrofuranylurethane that are potent against multi-PI-resistant HIV-1 variants in vitro.

含有大环成分和 3(R),3a(S),6a(R)-双四氢呋喃氨基甲酸酯的新型蛋白酶抑制剂 (PI)，可在体外有效对抗多重 PI 耐药的 HIV-1 变体。

• DOI: 10.1128/aac.01766-09
• 发表时间: 2010
• 期刊: Antimicrobial agents and chemotherapy
• 影响因子: 4.9
• 作者: Tojo,Yasushi;Koh,Yasuhiro;Amano,Masayuki;Aoki,Manabu;Das,Debananda;Kulkarni,Sarang;Anderson,DavidD;Ghosh,ArunK;Mitsuya,Hiroaki
• 通讯作者: Mitsuya,Hiroaki

In vitro selection of highly darunavir-resistant and replication-competent HIV-1 variants using a mixture of clinical HIV-1 isolates resistant to multiple conventional protease inhibitors.

使用对多种常规蛋白酶抑制剂具有耐药性的临床 HIV-1 分离株的混合物，在体外选择高度地瑞纳韦耐药且具有复制能力的 HIV-1 变体。

• 发表时间: 2010
• 期刊: J Virol.
• 作者: Koh Y;Amano M;Towata T;Danish M;Leshchenko-Yashchuk S;Das D;Nakayama M;Tojo Y;Ghosh AK;Mitsuya H
• 通讯作者: Mitsuya H

mCherry可視化HIV-1を用いたHIV-1体内播種早期ダイナミクスの検討:2

使用 mCherry 可视化 HIV-1：2 检查 HIV-1 在体内传播的早期动态

• 发表时间: 2010
• 作者: Yasuhiro Koh;M Aoki;M,Amano;H Ogata-Aoki;S Leschenko-Yashchuk;A Ghosh;H Mitsuya;Hiraoka K.;天野将之;Kurosawa H.;Matthew L.Danish;鍬田伸好;青木宏美
• 通讯作者: 青木宏美

Novel HIV-1 Protease Inhibitors (PIs) Containing a Bicyclic P2 Functional Moiety, Tetrahydropyrano-Tetrahydrofuran, That Are Potent against Multi-PI-Resistant HIV-1 Variants

• DOI: 10.1128/aac.01540-10
• 发表时间: 2011-04-01
• 期刊: ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY
• 影响因子: 4.9
• 作者: Ide, Kazuhiko;Aoki, Manabu;Mitsuya, Hiroaki
• 通讯作者: Mitsuya, Hiroaki

Tipranavir 耐性HIV はプロテアーゼ二量体化阻止能と酵素活性阻止能の双方を喪失している

替普拉那韦耐药的艾滋病毒已经失去了抑制蛋白酶二聚化的能力和酶活性。

• 发表时间: 2010
• 作者: 青木学;井手一彦;M.L.Danish;満屋裕明
• 通讯作者: 満屋裕明