Nachweis und Eigenschaft neuronaler und glialer TRP-Kanäle im zentralen Nervensystem der Maus in situ

小鼠中枢神经系统神经元和胶质TRP通道的原位检测和特性

• 批准号: 5403240
• 负责人: Dr. Andreas Beck
• 金额: --
• 依托单位: FR Experimentelle und Klinische Pharmakologie und Toxikologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 2004-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5403240?language=en
• 关键词: Nachweis; und; Eigenschaft; neuronaler; glialer

In den letzten Jahren wurden verschiedene Varianten von TRP-Proteinen in tierischen Zellen nachgewiesen, wovon ein Teil Speicher-aktivierte Calciumkanäle bildet. Die TRP-Forschung fand und findet meist an akut isolierten oder kultiverten Zellen sowie Zelllinien statt. Im zentralen Nervensystem wurde bisher lediglich die Anwesenheit diverser TRP-Proteine gezeigt, nicht aber deren Funktion untersucht. Der Nachweis der TRP-Proteine erfolgte entweder für das gesamte Gehirn z. B. über Northern-Blot-Analysen und/oder für verschiedene Hirnareale über In-Situ-Hybridisierung. In eigenen Arbeiten konnte in verschiedenen Zelltypen im hippokampalen Hirnschnitt der Maus fluorometrisch ein Speicher-aktivierter Calciumeinstrom nachgewiesen werden. Im vorliegenden Forschungsvorhaben soll daher in Neuronen und Astrozyten im Hirnschnitt der Maus mit Hilfe der Immunzytochemie und Einzelzell-RT-PCR die Anwesenheit und Verteilung verschiedener TRP-Proteine geprüft werden, die unter anderem möglicherweise für den im Hippokampus nachgewiesenen Speicher-aktivierten Calciumeinstrom verantwortlich sind. Darüber hinaus sollen die Eigenschaften der aus den TRP-Proteinen gebildeten Kanäle in den unterschiedlichen neuralen Zelltypen in situ mit Hilfe der Patch-Clamp-Technik und Fluorometrie genauer charakterisiert werden.

在过去的几年里，TRP蛋白的各种变体在第三个Zellen中被广泛使用，它们是一种钙激活剂。TRP的研究和发现主要是孤立的或孤立的。在中枢神经系统中，多种类型的TRP-蛋白质的作用更强，但功能不受影响。Der Nachweis der TRP-Proteine erfolgte entweder für das gesamte Gehirn z. B。über Northern-Blot-Analysen und/oder für versatiedene Hirnareale über In-Situ-Hybridisierung.在本实验中，我们将使用荧光法和活化钙试剂韦尔登对样品中的Zelltypen进行检验。通过免疫组化和Einzelzell-RT-PCR方法检测牛的神经元和星形胶质细胞中的TRP-蛋白质，并将其转化为韦尔登，然后通过Speicher-activierten Calciumeinstrom检测海马的神经元和星形胶质细胞。通过膜片钳技术和荧光光谱技术，我们可以解决TRP-蛋白在原位无创神经细胞中的特征性。