自己免疫性肝疾患発症に関わる肝内炎症惹起性の肝・脾多段階的免疫寛容誘導破綻の解析

点击翻译按钮获取中文摘要

＠肝内での炎症性、抗炎症性マクロファージ動態とマクロファージによる免疫寛容誘導の関連：M1、M2マクロファージ除去による肝内での活性化リンパ球除去動態の解析M1マクロファージ特異的マーカーのCD115、Gr1、Ly6Cに対するモノクローナル抗体、M2マクロファージ特異的マーカーCX3CR1に対するモノクローナル抗体を用いてM1、M2マクロファージを除去した際の、肝内での移入活性化リンパ球のアポトーシス誘導状態を解析したところ、M1マクロファージを除去した際には肝内活性化リンパ球除去が減弱した。一方M2マクロファージを除去しても肝内活性化リンパ球除去動態に変化はみられなかった。以上より、M1マクロファージは肝内活性化リンパ球除去に関与するがM2マクロファージは関与しないことが明らかとなった。＠肝内での炎症が類洞内皮細胞、星細胞による抗原提示に及ぼす影響無処置で肝内炎症が存在しないコントロールマウス、FCとIL-12の免疫により自己免疫性肝障害を誘導したマウスそれぞれの肝臓から類洞内皮細胞、星細胞を分離、類洞内皮細胞はコラゲナーゼ含有還流液を門脈から投与後に肝臓をMesh上ですりつぶし比重遠心法にて得た非実質細胞分画からME9F1ビーズを用いてAutoMacsにより分離し、Collagen coated wellで培養した。また星細胞は8.2％Nycodenz液を用い1400gで15分間遠心分離して得た含有分画をαSMA抗体で染色し純度を確認後に培養系に移行した。こうして得られた類洞内皮細胞、星細胞のMHC class II分子、CD28、CTLA-4、PD-1の発現動態をFACSにより解析し、肝内炎症の有無がそれら分子の発現に及ぼす影響を検討したところ、類洞内皮細胞では各分子の発現亢進が見られたが、星細胞では見られなかった。