Bioluminescence imaging of MMP-2 and its related proteins secretion

MMP-2及其相关蛋白分泌的生物发光成像

• 批准号: 23592754
• 负责人: SUZUKI Takahiro
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Aichi Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23592754/
• 关键词: 生物発光イメージング; MMP-2; 開口分泌; タンパク質分泌; がん細胞; 遊走細胞; bioluminescence imaging; Gaussia luciferase; exocytosis; coelenterazine; Bioluminescence imaging; cell migration; bioluminescence

MMP-2 is one of the enzymes in degradation of basement membrane collagen and has a major role in cancer cell invasion. MMP-2 is secreted as the inactive pro-form, and the inactive pro-form of MMP-2 binds on the cell surface, and then active MMP-2 is produced. We have established a method of video-rate bioluminescence imaging to visualize exocytotic protein secretion from a single living cell. This bioluminescence method has advantages for estimation of time-dependent changes of the amount of secreted protein and or visualization of protein secretion over the whole surface of a cell. As a result, we demonstrated that the repeated secretion of MMP-2 from specific sites at the leading edge of the cell. The analyses of bioluminescence video images of MMP2-GLase showed repeated secretion of MMP-2 from specific sites at the leading edge and bottom side of the cell, suggesting that the sites of MMP-2 secretion differ from the MMP-2 binding sites.

MMP-2是基底膜胶原蛋白降解的酶之一，在癌细胞浸润中具有重要作用。 MMP-2被分泌为非活性的促形式，MMP-2的非活性亲形成在细胞表面上结合，然后产生主动的MMP-2。我们已经建立了一种视频速率生物发光成像的方法，以可视化单个活细胞中的胞外蛋白分泌。这种生物发光方法具有估计分泌蛋白质量的时间依赖性变化和 / / / / / / / / / / /或细胞整个表面上蛋白质分泌的可视化的优势。结果，我们证明了MMP-2从细胞前缘的特定位点重复分泌。对MMP2-Glase的生物发光视频图像的分析显示，MMP-2从细胞前缘和底部的特定位点反复分泌，这表明MMP-2分泌的位点与MMP-2结合位点不同。

项目成果

ビデオレート生物発光イメージング法によるタンパク質分泌動態の可視化

使用视频速率生物发光成像可视化蛋白质分泌动态

• 发表时间: 2014
• 期刊: 生化学
• 作者: 鈴木崇弘;井上敏
• 通讯作者: 井上敏

Cell selective targeting of a simian virus 40 virus-like particle conjugated to epidermal growth factor

• DOI: 10.1016/j.jbiotec.2011.06.030
• 发表时间: 2011-09-10
• 期刊: JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
• 影响因子: 4.1
• 作者: Kitai, Yuichi;Fukuda, Hajime;Handa, Hiroshi
• 通讯作者: Handa, Hiroshi

第21回日本バイオイメージング学会学術 集会ベストイメージ賞受賞

荣获第21届日本生物影像学会学术会议最佳影像奖

ガウシアルシフェラーゼを用いた生物発光イメージング法によるMMP-2分泌の可視化

使用 Gaussia 荧光素酶通过生物发光成像可视化 MMP-2 分泌

• 发表时间: 2011
• 作者: 前田昌子;林文祥;玉置潤一郎;鶴岡正吉;井上富雄;鈴木崇弘,近藤千裕,金森孝雄,井上敏
• 通讯作者: 鈴木崇弘,近藤千裕,金森孝雄,井上敏

生細胞におけるタンパク質分泌のビデオレート生物発光イメージング

活细胞中蛋白质分泌的视频生物发光成像

• 发表时间: 2011
• 作者: Nakayama K;et al;鈴木崇弘,近藤千裕,金森孝雄,井上敏
• 通讯作者: 鈴木崇弘,近藤千裕,金森孝雄,井上敏