Bioluminescence imaging of MMP-2 and its related proteins secretion

MMP-2及其相关蛋白分泌的生物发光成像

• 批准号: 23592754
• 负责人: SUZUKI Takahiro
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Aichi Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23592754/
• 关键词: 生物発光イメージング; MMP-2; 開口分泌; タンパク質分泌; がん細胞; 遊走細胞; bioluminescence imaging; Gaussia luciferase; exocytosis; coelenterazine; Bioluminescence imaging; cell migration; bioluminescence

MMP-2 is one of the enzymes in degradation of basement membrane collagen and has a major role in cancer cell invasion. MMP-2 is secreted as the inactive pro-form, and the inactive pro-form of MMP-2 binds on the cell surface, and then active MMP-2 is produced. We have established a method of video-rate bioluminescence imaging to visualize exocytotic protein secretion from a single living cell. This bioluminescence method has advantages for estimation of time-dependent changes of the amount of secreted protein and or visualization of protein secretion over the whole surface of a cell. As a result, we demonstrated that the repeated secretion of MMP-2 from specific sites at the leading edge of the cell. The analyses of bioluminescence video images of MMP2-GLase showed repeated secretion of MMP-2 from specific sites at the leading edge and bottom side of the cell, suggesting that the sites of MMP-2 secretion differ from the MMP-2 binding sites.

MMP-2是参与基底膜胶原蛋白降解的酶之一，在癌细胞侵袭过程中起重要作用。MMP-2以失活前形态分泌，失活前形态与细胞表面结合，产生活性MMP-2。我们建立了一种视频速率生物发光成像的方法来观察单个活细胞的胞外蛋白分泌。这种生物发光方法在估计分泌蛋白量的随时间变化和或可视化整个细胞表面的蛋白质分泌方面具有优势。结果，我们证明了MMP-2从细胞边缘的特定部位反复分泌。对MMP2-GLase生物发光视频图像的分析显示，在细胞前缘和底部的特定位置重复分泌MMP-2，这表明MMP-2的分泌位点与MMP-2结合位点不同。

项目成果

ビデオレート生物発光イメージング法によるタンパク質分泌動態の可視化

使用视频速率生物发光成像可视化蛋白质分泌动态

• 发表时间: 2014
• 期刊: 生化学
• 作者: 鈴木崇弘;井上敏
• 通讯作者: 井上敏

第21回日本バイオイメージング学会学術 集会ベストイメージ賞受賞

荣获第21届日本生物影像学会学术会议最佳影像奖

ガウシアルシフェラーゼを用いた生物発光イメージング法によるMMP-2分泌の可視化

使用 Gaussia 荧光素酶通过生物发光成像可视化 MMP-2 分泌

• 发表时间: 2011
• 作者: 前田昌子;林文祥;玉置潤一郎;鶴岡正吉;井上富雄;鈴木崇弘,近藤千裕,金森孝雄,井上敏
• 通讯作者: 鈴木崇弘,近藤千裕,金森孝雄,井上敏

Video-rate bioluminescence imaging of protein secretion from a living cell.

活细胞蛋白质分泌的视频生物发光成像。

• DOI: 10.1007/978-1-62703-718-1_6
• 发表时间: 2014
• 期刊: Methods in molecular biology
• 作者: Takahiro Suzuki;S. Inouye
• 通讯作者: S. Inouye

Cell selective targeting of a simian virus 40 virus-like particle conjugated to epidermal growth factor

• DOI: 10.1016/j.jbiotec.2011.06.030
• 发表时间: 2011-09-10
• 期刊: JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
• 影响因子: 4.1
• 作者: Kitai, Yuichi;Fukuda, Hajime;Handa, Hiroshi
• 通讯作者: Handa, Hiroshi