Aspergillus nidulans の一酸化窒素耐性化の分子機構の解明

阐明构巢曲霉一氧化氮抗性的分子机制

• 批准号: 11F01090
• 负责人: 高谷 直樹
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11F01090/
• 关键词: Aspergillus nidulans; Nitric oxide; ヘム; メタロチオネイン; 亜硝酸; 糸状菌; 応用微生物学; porphobilinogen deaminase; heme; flavohemoglobin

A. nidulansのNO耐性化にかかわる新規遺伝子の発見とその生理機能の解明を目指した研究を遂行し、一定の成果を得ることができた。主な2つの成果は以下のとおりである。1.PBG-Dはどのような機構でNO耐性に関わるのか?:ヘム合成酵素であるPBG-Dが直接的にNOを解毒しているとは考えにくい。NO関連タンパク質には、フラボヘモグロビン(FHb)や亜硝酸還元酵素(NiiA)をはじめとするヘムタンパク質が多いことから、PBG-Dは、ヘム合成の促進によるヘムタンパク質の活性化を通して、A. nidulansのNO耐性化に関わると予想された。そこで、まず、FHbとNiiAをコードする遺伝子の遺伝子破壊株を作製し、それらのNO耐性能が低下するかどうかを検討した。その後、PBG-Dの高発現と低発現による二つの酵素の活性への影響を調べることにより、PBG-DのNO耐性化への影響を明らかとした。2.メタロチオネインによるNO耐性化:組換えメタロチオネインとNOとがin vitroでニトロソメタロチオネイン(MT-SNO)に変換されることを確認し、この反応の反応速度論的解析を行った。また、A. nidulansのメタロチオネイン高発現株、野生株、メタロチオネイン欠損株をNOに暴露したときの細胞内のニトロソ化タンパク質を比較し、メタロチオネインによるNO耐性化機構を解明することができた。また、上記のメタロチオネイン遺伝子とは異なる一般的なメタロチオネイン遺伝子の遺伝子破壊株を作製し、その重金属に対する耐性化能を比較した。

A. Nidulans 'NO tolerance and development of new genes, understanding of physiological functions, research and development of certain results The main 2 results are as follows: 1.PBG-D: PBG-D is a direct enzyme for NO detoxification. NO-related substances such as FHb, NiiA, PBG-D, NH3, NH4, NH4, NH4, Nidulans are resistant to NO, and they are resistant to NO and NO, and they are resistant to NO and NO The resistance to NO is low, and the resistance to NO is low. The effect of PBG-D on NO tolerance was also investigated. 2. NO tolerance: change in environment (MT-SNO) change in environment.また、A. Nidulans are highly developed, wild, and deficient in NO exposure, and their intracellular NO tolerance mechanisms are clarified. The resistance of heavy metals to heavy metals is compared with the resistance of heavy metals to heavy metals.

项目成果

Metallothionwin, a novel factor to suppress nitrosative Stress

Metallothionwin，一种抑制亚硝化应激的新因子

• 发表时间: 2013
• 作者: Shengmin Zhou;Toshiaki Narukami;and Naoki Takaya
• 通讯作者: and Naoki Takaya

Heme-Biosynthetic Porphobilinogen Deaminase Protects Aspergillus nidulans from Nitrosative Stress

• DOI: 10.1128/aem.06195-11
• 发表时间: 2011-10
• 期刊: Applied and Environmental Microbiology
• 影响因子: 4.4
• 作者: Shengmin Zhou;Toshiaki Narukami;Misuzu Nameki;T. Ozawa;Yosuke Kamimura;T. Hoshino;N. Takaya

Analysis of the novel nitrosative stress resistant protein metallothionein in Aspergillus nidulans

构巢曲霉新型亚硝化应激抗性蛋白金属硫蛋白的分析

• 发表时间: 2012
• 作者: Zhou;S.;Narukami;T.;Kamimura;Y.;Hoshino;T.;Takaya;N.
• 通讯作者: N.