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エイズウイルス感染病態におけるマクロファージの意義の解明

阐明巨噬细胞在艾滋病病毒感染病理学中的重要性

基本信息

批准号：
12J02574
负责人：
坂部沙織
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J02574/
关键词：
エイズウイルスマクロファージ活性化 M1 M2

项目摘要

背景と目的マクロファージ(MΦ)は、その活性化の様式からM1とM2MΦに分類されることが近年報告されている。M1MΦは、Th1細胞と相互作用し、細胞性免疫や組織障害に関わり、M2MΦは、Th2細胞と相互作用し、液性免疫や創傷治癒に関わる。ヒトがエイズウイルスに感染すると、インフルエンザ様症状を示す急性期、無症候である慢性期を経て、エイズを発症する。M1MΦは急性期に、M2MΦは慢性期からエイズ期の病態進行に関与するという仮説をもとに、M1MΦ、M2MΦにおけるエイズウイルスの挙動を明らかにし、MΦの活性化がエイズの病態進行にどのような影響を与えるのかを明らかにすることを目的とし、本研究を行っている。研究実施状況(1)In vitroにおけるM1/M2MΦの作出ヒト末梢血およびアカゲザル末梢血から単球を分離し、M-CSFを用いてMΦを誘導した。MΦ誘導後、IFN-γまたはIL-4を用いて、MΦを活性化させ、M1およびM2MΦのマーカーの発現をqRT-PCRを用いて調べた。ヒト、サルともに、IFN-γで活性化させたMΦはM1の、IL-4で活性化させたMΦはM2のマーカーを発現していることが確認できた。(2)M1/M2MΦにおけるエイズウイルスレセプター・コレセプター発現の解析M1MΦ、M2MΦでは、どちらの方にエイズウイルスが感染しやすいかを明らかにするため、エイズウイルスのレセプターおよびコレセプターであるCD4,CXCR4,およびCCR5の発現量をqRT-PCRおよびFACSを行い比較解析した。どちらのMΦでもCD4,CXCR4,CCR5全ての発現が認められたが、M2MΦでは特にCXCR4の発現が増加していることが分かった。サルとヒトどちらのMΦでも、同様の結果が得られた。(3)H1MΦ、M2MΦにおけるエイズウイルスの複製ヒトM1およびM2MΦに、コレセプター指向性の異なるHIV-R5、R5×4,およびX4ウイルスを感染させ、ウイルス増殖を比較した。R5ウイルスは、M0(活性化させる前のMΦ)>M2>M1の順に、R5×4ウイルスはM2>M0>M1の順にウイルス増殖が減少した。R5×4ウイルスが膿MΦで高い増殖性を示したことは、CXCR4の発現がM2MΦで高くなっていたためであると考えられる。サルに感染するエイズウイルスSIVについても、サルのMΦにおいて同様の結果が得られた。(4)M1MΦ、M2MΦの識別法の検討個体内でのMΦの活性化状態を識別するため、FACSを用いてM1およびM2MΦの識別を試みた。活性化前と比べ、最も発現量の増加が認められた因子はM1MΦではCXCL9、M2MΦではCCL18であった。これらの因子は、ケモカインであるため、Intracellular staining(ICS)を行った。さらに条件検討が必要ではあるが、In vitroにおいて誘導したM1およびM2MΦは、CXCL9およびCCL18に対する抗体を用いて、識別できるのではないかと考えられる。

Background: The activity of M1 and M2M is reported in recent years. M1M Φ, Th1 cells and interaction, cellular immunity and tissue damage, M2MΦ, Th2 cells and interaction, fluid immunity and wound healing. The symptoms are acute, asymptomatic, and symptomatic. M1MΦ is related to acute phase, M2 M Φ is related to pathological process in chronic phase, M1MΦ and M2 M Φ are related to pathological process, and activation of MΦ is related to pathological process. The results showed that: (1)In vitro, M1/M2MΦ was used to isolate and induce M-CSF from peripheral blood. After induction of MΦ, IFN-γ was used to modulate IL-4, MΦ activation, M1 and M2MΦ production by qRT-PCR. The activity of IFN-γ and IL-4 was confirmed by the detection of M1 and M2. (2)M1 Analysis of CD4,CXCR4, CCR5 by qRT-PCR and FACS. CD4,CXCR4,CCR5 all appear together, M2MΦ appears together, CXCR4 appears together.サルとヒトどちらのMΦでも、同様の结果が得られた。(3)H1MΦ, M2MΦ, HIV-R5, R5× 4, HIV-X4 Φ, M1 Φ, M2MΦ, HIV-R5 × 4, HIV-R5 × 4 × 4, HIV-R5 ×4, HIV-R5 × 4 × 4, HIV-R5 ×4, HIV-R5 ×4, HIV-R5 × 4 × 4, HIV-R5 × 4, HIV-R R5 * 4 * 5 R5×4 The results of SIV, MΦ and M Φ were obtained. (4) Identification of M1MΦ and M2 M Φ by FACS and identification of M1 MΦ and M2 M Φ in vivo. The increase in pre-activation ratio and maximum observed amount can be measured by factors such as M1M Φ and CXCL9, and M2MΦ and CCL18. Intracellular staining(ICS) In vitro, M1 and M2M are induced by CXCL9 and CCL18.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Differences in cytokine production in human macrophages and in virulence in mice are attributable to the acidic polymerase protein of highly pathogenic influenza A virus subtype H5N1.

DOI：
10.1093/infdis/jis523
发表时间：
2013-01
期刊：
The Journal of infectious diseases
影响因子：
0
作者：
Saori Sakabe;Ryo Takano;T. Nagamura-Inoue;N. Yamashita;C. A. Nidom;Mai thi Quynh Le;K. Iwatsuki-Horimoto-K.-Iwatsuki-H
通讯作者：
Saori Sakabe;Ryo Takano;T. Nagamura-Inoue;N. Yamashita;C. A. Nidom;Mai thi Quynh Le;K. Iwatsuki-Horimoto-K.-Iwatsuki-H

A replication-incompetent virus possesing an uncleavable hemagglutinin as an influenza vaccine.

一种无复制能力的病毒，具有不可裂解的血凝素，可作为流感疫苗。