Faltung und Assemblierung von Spinnenseidenproteinen

蜘蛛丝蛋白的折叠和组装

• 批准号: 5428439
• 负责人: Professor Dr. Thomas Scheibel
• 金额: --
• 依托单位: Lehrstuhl für Biomaterialien
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2013-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5428439?language=en
• 关键词: Faltung; und; Assemblierung; von; Spinnenseidenproteinen

In dem beantragten Projekt sollen die Grundlagen der Assemblierung von Spinnenseidenfibrillen und -fäden der "dragline" Spinnenseidenproteine ADF3 und ADF4 der Gartenkreuzspinne Araneus diadematus untersucht werden. In Vorarbeiten wurde von uns die rekombinante Expression von adf3 und adf4 im Baculovirus-Sf9Expressionssystem etabliert, so dass Untersuchungen mit rekombinant hergestellten, authentischen Spinnenseidenproteinen durchgeführt werden können. Um die Struktur-/Funktionsbeziehung dieser beiden Spinnenseidenproteine im Detail zu analysieren, sollten auch unterschiedliche, aus der Primärsequenz der Spinnenseidenproteine ausgewählte "Spinnensiedengenmodule", die für unterschiedliche repetitive Sequenzen in den Spinnenseiden kodieren, exprimiert werden. Die synthetisch hergestellten Spinnenseidengenmodule sind für die bakterielle Expression optimiert und könne beliebig miteinander kombiniert werden, was zu unterschiedlichen synthetischen Spinnenseidengenen führt. Die in Sf-9 Zellen und die in Bakterien produzierten Proteine sollen auf Struktur, Stabilität, Löslichkeit und Aggregations-/Assemblierungsverhalten untersucht werden, um Einblicke in die den Spinnenseidenfäden zugrunde liegende einzigartige Stabilität zu gewinnen.

在该工程中，解决了大腹园蛛（Araneus diadematus）韦尔登的“拖丝”纺锤体蛋白ADF 3和ADF 4的组装基础。在建立杆状病毒-Sf 9表达系统的基础上，我们构建了adf 3和adf 4的重组表达，因此，通过重组表达，可以获得韦尔登蛋白的真实表达。在对Spinnenseeproteine的结构/功能进行详细分析时，也可以通过Spinnenseeproteine的Primärsequenz ausgewählte“Spinnenseeproteine engenmodule”，对Spinnenseeproteine中的重复序列进行非重复性测序，从而获得韦尔登。Die synthetisch hergestellten Spinnensearchgenmodule sind für die bakterielle Expression optimiert und könne beliebig miteinander kombiniert韦尔登，was zu unteriedlichen synthetischen Spinnensearchgenen führt. Sf-9 Zellen和Bakterien生产的蛋白质sollen auf Struktur，Stabilität，Löslichkeit und Aggregations-/Assemblierungsverhalten untersucht韦尔登，um Einblicke in die den Spinnensealing fäden zugrunde einzigartige Stabilität zu gewinnen.

项目成果

Spider Silk Capsules as Protective Reaction Containers for Enzymes

• DOI: 10.1002/adfm.201302100
• 发表时间: 2014-02-01
• 期刊: ADVANCED FUNCTIONAL MATERIALS
• 影响因子: 19
• 作者: Bluem, Claudia;Nichtl, Alfons;Scheibel, Thomas
• 通讯作者: Scheibel, Thomas