Strukturaufklärung und Assemblierung von African-cassava-mosaic-Virionen

非洲木薯花叶病毒体的结构解析和组装

基本信息

项目摘要

Durch Elektronen-Cryomikroskopie (ECM) wurde die bisher höchste Auflösung der ACMV-Kapside für Begomoviren (Familie Geminiviridae) erreicht. Die Bindeeigenschaften von Abutilon mosaic virus (AbMV) Hüllprotein mit DNA sind mit dem electrophoretic mobility shift assay (EMSA) in vitro charakterisiert worden. Aus Pflanzen isolierte Geminiviren sind allerdings nicht homogen, weil zum einen heterogene virale DNA verpackt wird, zum zweiten die Virusproteine proteolytisch angegriffen werden und zum dritten das Nuclear shuttle protein (NSP), das gleiche Eigenschaften wie das Hüllprotein besitzt, co-assemblieren könnte. Daraus entstehende Mikrohetereogenitäten beeinträchtigen die Auflösung in der ECM. Aus diesen Gründen sollen Hüllproteine des ACMV ectopisch in Hefen exprimiert und maßgeschneiderte virale DNA in Bakterien/Phagen oder Hefen repliziert werden. Nach Assemblierung in vitro oder in vivo sollen Geminipartikel mittels klassischer Elektronenmikroskopie, ECM, elektronenmikroskopischer Tomographie und Atomic force microscopy (AFM) analysiert werden. Dabei sollen Hüllproteine von ACMV-Stämmen verglichen werden, die von der Weißen Fliege (Bemisia tabaci) übertragen (ACMV-Nigeria) oder nicht übertragen werden (ACMV-Kenia).
Durch Elektronen-Cryomikroskopie (ECM) wurde die bisher höchste Auflösung der ACMV-Kapside für Begomoviren (Familie Geminiviridae) erreicht。苘麻花叶病毒 (AbMV) Hüll 蛋白与 DNA 结合,并与电泳迁移率变动分析 (EMSA) 体外特征相结合。 Aus Pflanzen isolierte Geminiviren sind allerdings nicht homer, weil zum einen 异质病毒 DNA verpackt wird, zum zweiten die Virus Proteine proteolytisch angegriffen werden und zum dritten das Nuclear Shuttle Protein (NSP), das gleiche Eigenschaften wie das Hüll Protein besitzt, co-assemblieren könnte. Daraus entstehende Mikrohetereogenitäten beeintrachtigen die Auflösung in der ECM。 Aus diesen Sollen Hüll Proteine des ACMV extopisch in Hefen exprimiert und maßgeschneiderte 病毒 DNA in Bakterien/Phagen oder Hefen repliziert werden. Nach 的体外组装或体内组装均适用于微型电子、ECM、微型断层扫描和原子力显微镜 (AFM) 分析。 ACMV-Stämmen verglichen werden 的 Dabei sollen Hüll Proteine,die von der Weißen Fliege (Bemisia tabaci) übertragen (ACMV-尼日利亚) 或 nicht übertragen werden (ACMV-肯尼亚)。

项目成果

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