Strukturaufklärung und Assemblierung von African-cassava-mosaic-Virionen

非洲木薯花叶病毒体的结构解析和组装

基本信息

项目摘要

Durch Elektronen-Cryomikroskopie (ECM) wurde die bisher höchste Auflösung der ACMV-Kapside für Begomoviren (Familie Geminiviridae) erreicht. Die Bindeeigenschaften von Abutilon mosaic virus (AbMV) Hüllprotein mit DNA sind mit dem electrophoretic mobility shift assay (EMSA) in vitro charakterisiert worden. Aus Pflanzen isolierte Geminiviren sind allerdings nicht homogen, weil zum einen heterogene virale DNA verpackt wird, zum zweiten die Virusproteine proteolytisch angegriffen werden und zum dritten das Nuclear shuttle protein (NSP), das gleiche Eigenschaften wie das Hüllprotein besitzt, co-assemblieren könnte. Daraus entstehende Mikrohetereogenitäten beeinträchtigen die Auflösung in der ECM. Aus diesen Gründen sollen Hüllproteine des ACMV ectopisch in Hefen exprimiert und maßgeschneiderte virale DNA in Bakterien/Phagen oder Hefen repliziert werden. Nach Assemblierung in vitro oder in vivo sollen Geminipartikel mittels klassischer Elektronenmikroskopie, ECM, elektronenmikroskopischer Tomographie und Atomic force microscopy (AFM) analysiert werden. Dabei sollen Hüllproteine von ACMV-Stämmen verglichen werden, die von der Weißen Fliege (Bemisia tabaci) übertragen (ACMV-Nigeria) oder nicht übertragen werden (ACMV-Kenia).
Durch Elektronen-Cryomikroskopie(ECM)Wurde Die BisherHöchsteAuflösungder acmv-kapsidefürbegomoviren(familie geminiviridae)Erreicht。 Die Bindeeigenschaften von Abutilon Mosaic病毒(ABMV)HüllProteinMIT DNA sind MIT MIT DEM电泳移动性转移测定法(EMSA)在体外Charakterisiert Worden。 Aus pflanzen siblierte geminiviren sind Sind nicht均质,Weil zum zum einen einen einen reinen virale virale virale dna verpackt野生,病毒蛋白在维尔榨蛋白(NSP)中,而DNA在维榨蛋白质中,这是处女蛋白区域中的DNA形式,是drigrain of Virgin of dna的形式。 Bakterien/Phagen Oder Hefen Replicaziert Werden。 NACH组装体体内体体内的ODER在体内sollen geminipartikel bittels klassischer elektronennenmikroskopie,ECM,Elektronennenmikroskopie,AFM,原子力显微镜显微镜(AFM)分析仪。 DabeiSollenHüllPreteineVon Acmv-StämenVerglichen Werden,DieVonWeißenFliege(Bemisia Tabaci)übertragen(ACMV-Nigeria)(ACMV-Kenia)(ACMV-Kenia)。

项目成果

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