胆肝癌とその幹細胞の悪性分化に関わる新規糖鎖修飾蛋白質の同定と構造機能の解析

参与胆管性肝癌及其干细胞恶性分化的新型糖基化蛋白的鉴定及结构功能分析

• 批准号: 14F04099
• 负责人: 荒木 令江
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14F04099/
• 关键词: Cancer Stem Cell; cholangiocarcinoma; glyco-proteomics; 胆管癌; グライコミクス; 癌幹細胞

胆肝癌(CCA)は、最も予後が悪い悪性腫瘍である。近年、がん幹細胞の概念が導入され、CCAにおいてもこれらの存在が示唆され、これを用いたCCA悪性化メカニズムの解明が期待されている。本研究では、CCAとCCA幹細胞を中心に、悪性腫瘍分化に関わる特異的糖蛋白質の同定と、その修飾構造の詳細な構造解析、およびその生物学的意義を解析した。まず、患者組織から確立されたCCA培養細胞の脱分化モデルの樹立を行った。幹細胞培地にてCCA細胞を長期培養したところ、最も未分化とされるM055CCA細胞においてsphere状の幹細胞様変化が観察され、FCSを添加することによって、再分化することが判明した。sphere状態で培養を続け、20回目の継代培養を経た細胞において各種マーカー類の解析を行ったところ、sphere状態のCCAにはSox2をはじめとする幹細胞マーカー群、およびo-GlcNacylation修飾タンパク質(OGP)の発現が亢進する事が判明した。同時進行で樹立を行ったGlioma幹細胞についても同様にo-GlcNacylationの顕著な増加が観察された。そこで、o-GlcNacylationに関わる酵素GFAT阻害剤6-Diazo-5-oxo-L-norleucineおよび活性化剤Glutamine/N-Acetyl Glucosamineの処理をおこなったところ、前者においては幹細胞形成阻害が、また後者においては分化誘導阻害が顕著であることが判明した。さらに、修飾分子の同定をClick-IT®-GlcNAz法を用いた質量分析によって行い、現在までに幹細胞形成に重要な23種のOGPの同定に成功している。興味深いことにこれらには転写や染色体リモデリングの関連分子が多く含まれており、現在詳細な検証実験を行っている。がん幹細胞モデルにおいて、o-GlcNacylationが悪性分化に関わる分子発現の調節に関わっており、修飾タンパク質や責任酵素の阻害剤ががん幹細胞による悪性分化の阻害に有効である可能性が示唆された。

Biliary liver cancer (CCA) が悪, postmost が悪 悪 abscess である. In recent years, が の concept が import さ ん stem cells れ, CCA に お い て も こ れ ら の is が in stopping さ れ, こ れ を with い た CCA 悪 sexualising メ カ ニ ズ ム の interpret が expect さ れ て い る. This study で は, CCA と CCA に を center, 悪 sex is swollen sores differentiated に masato わ る specific sugar protein の with と, そ の modified structure の な structure in detail, お よ び そ の biological significance を parsing し た. Youdaoplaceholder0, patient tissue ら ら establish されたCCA cultured cells <s:1> dedifferentiation モデ モデ <s:1> establish を lines った. Stem cell culture to に て CCA cell を long-term culture し た と こ ろ, most も undifferentiated と さ れ る M055CCA cells に お い て others in sphere shape の stem cells - the が 観 examine さ れ, FCS を add す る こ と に よ っ て, redifferentiation す る こ と が.at し た. State sphere で cultivate を 続 け, 20 pa2 の 継 generation develop を 経 た cells に お い て various マ ー カ ー class line analytical を の っ た と こ ろ, sphere の CCA に は Sox2 を は じ め と す る stem cells マ ー カ ー group, お よ び o - GlcNacylation modified タ ン パ ク mass (OGP) の 発 now が syndrone Go to する to が to determine た. Simultaneously で line set を っ た Glioma stem cells に つ い て も with others に o - GlcNacylation の 顕 with な raised が 観 examine さ れ た. Youdaoplaceholder0 で で, o-GlcNacylationに related to わる enzyme GFAT inhibitor 6-Diazo-5-oxo-L-norleucineおよび activator Glutamine/N-Acetyl Glucosamine の 処 Richard を お こ な っ た と こ ろ, the former に お い て は stem cells form resistance against が, ま た latter に お い て は differentiation inducing resistance against が 顕 the で あ る こ と が.at し た. Youdaoplaceholder0, modified molecules are similar to をClick-IT&#174; を GlcNAz method with い た quality analysis に よ っ て い, now ま で に important な 23 kinds of stem cells to form に の OGP の with fixed に successful し て い る. Fun deep い こ と に こ れ ら に は planning write や chromosome リ モ デ リ ン グ の masato contains more than even the molecular が く ま れ て お り, now detailed な 検 card be 験 を line っ て い る. が ん stem cells モ デ ル に お い て, o - GlcNacylation が 悪 sexual differentiation に masato わ る molecular 発 is の regulating に masato わ っ て お り, modified タ ン パ ク qualitative や responsibility enzyme の resistance against tonic が が ん stem cells に よ る 悪 sexual differentiation の resistance against に have sharper で あ が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

O-GlcNAcylation regulates the stemness-maintenance of glioma stem cells

O-GlcNAc糖基化调节神经胶质瘤干细胞的干性维持

• 发表时间: 2015
• 作者: Atit Silsirivanit;Akiko Niibori-Nambu;Minako Nagai;Megumi Nagayama;Norie Araki
• 通讯作者: Norie Araki

CA-S27: A novel Lewis a associated carbohydrate epitope is diagnostic and prognostic for cholangiocarcinoma

• DOI: 10.1111/cas.12222
• 发表时间: 2013-10-01
• 期刊: CANCER SCIENCE
• 影响因子: 5.7
• 作者: Silsirivanit, Atit;Araki, Norie;Wongkham, Sopit
• 通讯作者: Wongkham, Sopit

熊本大学大学院生命科学研究部腫瘍医学分野

熊本大学生命科学研究生院肿瘤科

Interactome analysis identified a novel interaction form of TCTP and translation elongation factors in Neurofibromatosis-type 1-associated tumors.

相互作用组分析确定了 1 型神经纤维瘤病相关肿瘤中 TCTP 和翻译延伸因子的新型相互作用形式。

• 发表时间: 2015
• 作者: 小林 大樹 ;徳田 高穂 ;長山 慈 ;平山 未央 ;大槻 純男 ;荒木 令江
• 通讯作者: 荒木 令江

Development of a fully automated two-dimensional electrophoresis device, Auto-2D, and its application for the integrated proteomics

全自动二维电泳仪Auto-2D的研制及其在蛋白质组学集成中的应用

• 发表时间: 2014
• 作者: Norie Araki;Akiko Nambu;Uichi Midorikawa;Souhei Mizuguchi;Daiki Kobayashi;Jun-ichi Kuratsu
• 通讯作者: Jun-ichi Kuratsu