Wechselwirkungen zwischen Transportproteinen des Abutilon-Mosaik-Geminivirus (AbMV) und pflanzlichen Signalwegen

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Die Proteine DNA B, BC1 (Movement-Protein, MP) und BV1 (Nuclear-Shuttle-Protein, NSP), des Abutilon Mosaik Virus (AbMV) sind für den viralen Transport essentiell und Determinanten der Pathogenität. Beides setzt Wechselwirkungen zwischen ihnen und Wirtsproteinen voraus, welche im beantragten Projekt identifiziert und in ihrer Bedeutung für Virustransport und Krankheitssymptome analysiert werden sollen. Interaktionspartner von BC1 und BV1 sollen aus der Wirtspflanze N. benthamiana und der Nicht-Wirtspflanze A. thaliana durch Hefe-Systeme (Zwei-Hybrid-/Cyto-Trap) isoliert werden. Bindungspartner werden In-vitro und in der Pflanzenzelle sowohl durch immunologische (Immunopräzipitation/-lokalisation) als auch durch mikroskopische Methoden (Fluoreszenzmikroskopie/FluoreszenzResonanz-Energie-Transfer (FRET)) geprüft werden. Die Funktion der Proteinpartner bei Transport und Symptomentwicklung soll mittels ihres Expressionsprofils, ihrer Überexpression und durch "Nullmutationen" (D-DNA-Insertionsmutanten/posttranskriptionales Gene Silencing) in Kombination mit GFP-Fussionen von BC1 und BV1 in Abhängigkeit von der AbMV-Infektion untersucht werden.