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動物の初期胚における遺伝子発現と細胞分裂の同期機構の解析

早期动物胚胎基因表达与细胞分裂同步机制分析

基本信息

批准号：
15J01153
负责人：
池田達郎
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度におこなった初期胚におけるRNAポリメラーゼII（Pol II）に対する抗体を用いたChIP-seqの情報解析手法を見直した。その結果、8細胞期から44個、16細胞期から195個の遺伝子が転写を開始すると評価された。今回の結果から新たに初期胚で転写されると予想された遺伝子は、実際に逆転写-定量PCR法により転写産物の増加を検出することができた。これら最初期に転写が開始される遺伝子の71%は、転写開始以前の発生段階で転写開始点付近にPol IIが結合して停止していた。このような動態の観察は他の動物の胚性の転写開始以前では観察されておらず、異なる動物間では胚性の転写開始期にPol IIをリクルートする機構に違いがあることを示唆している。また昨年度に、転写抑制因子Prdm1-r.a（BZ1）、Prmd1-r.b（BZ2）およびHes.aの同時機能阻害胚では、脳の系譜で異所的に転写因子Brachyuryが発現し脊索の発生プログラムが活性化してしまうことを見出した。Prdm1-r.a、Prdm1-r.bおよびHes.aは転写因子Foxa.aとZic-r.bの発現を時間的に調節しており、この時間的な調節が機能しなくなるとFoxa.aとZic-r.bが予定脳細胞細胞で同時に発現してしまい（脊索の系譜で見られる調節）、このような異所的なBrachyuryの活性化につながることがわかった。本年度は上記の同時機能阻害胚で脊索の分化マーカー遺伝子が実際に脳の系譜で異所発現していることを確認した。また、脳の初期マーカー遺伝子の発現は消失していないことを見出した。さらにFoxa.aとFgfシグナリングがPrdm1-r.aの発現を32細胞期に活性化していることを明らかにした。こうして、脳と脊索の発生運命の決め分けに働くFoxa.aとZic-r.bの発現の時間的な調節の巧妙な仕組みが明らかとなった。これらの成果を筆頭著者として論文にまとめDevelopment誌に発表した。

Last year, the initial embryo was called RNA. The antibody was II (Pol II). The antibody was analyzed by the method of ChIP-seq. The results showed that there were 44 8-cell cycles and 195 16-cell cycles. The results show that in the early stage of the new experiment, you want to make sure that you want to make sure that you don't want to, and that you can use the quantitative PCR method to improve the quality of the data. The starting point of the initial writing session will be 71%, and the starting point of the initial writing session will be paid close to the Pol II starting point. During the period of the beginning of the writing of embryogenic equipment between Pol II and other animals, please check the period of the beginning of the writing of embryogenic agents. Last year, writing inhibitors Prdm1-r.a (BZ1) and Prmd1-r.b (BZ2) were able to block the embryo by using the synchronous machine, and the writing factor Brachyury was used to show that the notochordal cord was activated. Prdm1-r.a, Prdm1-r.b, Foxa.a, Zic-r.b, Rhizophora, Rhizophora, Rhizoma, The Brachyury of your home is active. You know, you don't know what to do. This year, the synchronous machine can prevent the embryo notochord differentiation from being confirmed by the international system. In the early days, please tell me that the baby has disappeared. Foxa.a, Fgf, Prdm1-r.a, cell phase 32, activation, cell cycle, cell cycle, cell cycle An ingenious group of officers and staff members in the current time to determine the distribution of Foxa.an and Zic-r.b in order to know how to make a decision. The results show that the authors do not want to write the text. They do Development the list.