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動物の初期胚における遺伝子発現と細胞分裂の同期機構の解析

早期动物胚胎基因表达与细胞分裂同步机制分析

基本信息

批准号：
15J01153
负责人：
池田達郎
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-24 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度におこなった初期胚におけるRNAポリメラーゼII（Pol II）に対する抗体を用いたChIP-seqの情報解析手法を見直した。その結果、8細胞期から44個、16細胞期から195個の遺伝子が転写を開始すると評価された。今回の結果から新たに初期胚で転写されると予想された遺伝子は、実際に逆転写-定量PCR法により転写産物の増加を検出することができた。これら最初期に転写が開始される遺伝子の71%は、転写開始以前の発生段階で転写開始点付近にPol IIが結合して停止していた。このような動態の観察は他の動物の胚性の転写開始以前では観察されておらず、異なる動物間では胚性の転写開始期にPol IIをリクルートする機構に違いがあることを示唆している。また昨年度に、転写抑制因子Prdm1-r.a（BZ1）、Prmd1-r.b（BZ2）およびHes.aの同時機能阻害胚では、脳の系譜で異所的に転写因子Brachyuryが発現し脊索の発生プログラムが活性化してしまうことを見出した。Prdm1-r.a、Prdm1-r.bおよびHes.aは転写因子Foxa.aとZic-r.bの発現を時間的に調節しており、この時間的な調節が機能しなくなるとFoxa.aとZic-r.bが予定脳細胞細胞で同時に発現してしまい（脊索の系譜で見られる調節）、このような異所的なBrachyuryの活性化につながることがわかった。本年度は上記の同時機能阻害胚で脊索の分化マーカー遺伝子が実際に脳の系譜で異所発現していることを確認した。また、脳の初期マーカー遺伝子の発現は消失していないことを見出した。さらにFoxa.aとFgfシグナリングがPrdm1-r.aの発現を32細胞期に活性化していることを明らかにした。こうして、脳と脊索の発生運命の決め分けに働くFoxa.aとZic-r.bの発現の時間的な調節の巧妙な仕組みが明らかとなった。これらの成果を筆頭著者として論文にまとめDevelopment誌に発表した。

In the early stages of the disease, RNA sequencing II (Pol II) was used to analyze the information of antibodies. The results showed that there were 44 genes at 8-cell stage and 195 genes at 16-cell stage. The results of this study are as follows: (1) The initial stage of PCR is expected to be completed, and (2) The reverse transcription-quantitative PCR method is expected to be completed. 71% of the initial phase of writing begins with the first phase of writing, and the second phase of writing begins with the second phase of writing. This dynamic observation of the animal embryo before the start of writing, different animal embryo before the start of writing, Pol II, the organization of the violation of the instructions In the past year, the inhibition factors Prdm1-r. a (BZ1), Prmd1-r. b (BZ2) and Hes.a were found to inhibit the development and activation of the gene. Prdm1-r.a, Prdm1-r. b and Hes. a regulate the occurrence time of Foxa. a and Zic-r. b, and regulate the occurrence time of Foxa. a and Zic-r. b. This year, the simultaneous function of inhibiting the differentiation of the chordae was confirmed. In the early days of the war, the children appeared and disappeared. Foxa. a and Fgf are active in the development of Prdm1-r. a in the 32-cell stage. The time of the occurrence of Foxa. a and Zic-r. b is adjusted skillfully. The author of this paper is the author of the paper.