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Lineage dynamics and heterogeneity of primordial germ cells producing primordial follicles

产生原始卵泡的原始生殖细胞的谱系动力学和异质性

基本信息

批准号：
21K15111
负责人：
池田達郎
金额：
$ 3.08万
依托单位：
National Institute for Basic Biology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では雌マウス胎仔の始原生殖細胞（PGCs）を非常に多様なDNAバーコードで標識して子孫細胞（クローン）を追跡することにより、個々のPGCのクローンが生じる原始卵胞の数と質の不均一性を解析する。2021年度において卵巣に入った2000個程度のPGCsにバーコードを導入したのち、その後の原始卵胞が生じた生後10日までの複数の発生段階で卵巣を取得し、生殖細胞に含まれるバーコードをSequelシーケンスしていた。2022年度はまずそのシーケンス結果が届いたので解析した。卵巣に入ったPGCsは減数分裂を開始し、細胞死を伴いながら生後10日までに1/3まで細胞数が減少することが知られている。この過程で、バーコードの種類数は半分程度に減少すること、一方で200以上の多様性を維持していることが示唆された。これはPGCsが合胞体（シスト）を形成しシストあたり1つの卵母細胞を作り出すことを提唱した先行研究と矛盾しない結果であった。2021年度の解析から、PGCsが遊走して卵巣に入る過程でクローンサイズの不均一性が生じることがわかっていた（この観察は雄と同様）。このとき、クローン間で遺伝子発現の違いがどのように存在するかを知るため、バーコード転写型マウスを用いて、誘導直後のPGCsをバーコード標識したのち、卵巣に入ったPGCsをFACSソートし、シングルセルでcDNAを増幅した。産物をもとにシングルセルRNA-seqおよびバーコードシーケンスのライブラリをそれぞれ作成し、シーケンス発送した。本研究と並行して進めている雄生殖系列の研究が先に発展しており、2022年度は主に雄の成果を学会等で発表したが、付随して雌のデータを基に両性間の相違を議論した。

In this study, maternal maternal fetal primordial reproductive cell (PGCs) was used to analyze the heterogeneity of primordial oocyte population (PGCs). In this study, female maternal fetal primordial reproductive cell (PGCs) was used to analyze the heterogeneity of primordial oocyte population. In the year of 2021, there are 2000 levels of PGCs pregnancy, 10 days after the birth of the primordial oocytes, the reproduction of the eggs and the reproduction of the reproductive cells. The reproductive cells contain the pregnancy cycle, the Sequel cycle, and the pregnancy cycle. The results of the year 2022 were analyzed in the first half of the year. When the egg enters PGCs, the meiosis begins and the cell dies with the death of the ovary. 10 days after birth, the number of cells is less than 1 day after birth, and the number of cells is reduced. The number of people who are involved in the process and the number of people who are involved in the process is slightly lower than that of one party, and more than 200 percent of one party is responsible for maintaining the information. The formation of PGCs syncytial bodies (syncytids) is called oocyte formation. The oocytes are called oocytes. In the year 2021, the data analysis and PGCs analysis show that there is a significant difference in the distribution of heterogeneity in the process. In this case, you can see that there is a message that you know that there is a message, that you can write it, that you can use it, that you can use it, that you can PGCs it, that you don't know what to do, that you don't know what to FACS, and that you don't know if you want to use it. Please tell me what to do and what you can do to make it, and then send it to you. This is not a good thing to do. In this study, we conducted a series of studies on male reproduction, including a series of studies on male reproduction, including a series of studies on male reproduction, including a series of studies on male reproduction, including a series of studies on male reproduction, including a series of studies on male reproduction in 2022.