Characterization of the ubiquitin-protein ligase activity of the Mdm2/MdmX complex

Mdm2/MdmX 复合物泛素蛋白连接酶活性的表征

• 批准号: 5439249
• 负责人: Professor Dr. Martin Scheffner
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Zelluläre Biochemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2006-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5439249?language=en
• 关键词: Characterization; ubiquitin; protein; ligase; activity

Die RING finger Proteine Mdm2 und MdmX weisen sowohl strukturelle als auch funktionelle Ähnlichkeiten zueinander auf und sind bedeutende Antagonisten des Tumorsuppressors p53. Mdm2 ist ein Mitglied der Familie der sog. RING finger UbiquitinProteinligasen (E3) und induziert den proteolytischen Abbau von p53 und somit dessen Inaktivierung. Im Gegensatz zu Mdm2 scheint MdmX keine E3-Aktivität zu haben. Bei biochemischen Untersuchungen zur E3-Aktivität von Mdm2 konnten wir kürzlich Hinweise erhalten, dass Md mX die Eigenschaft eines Cofaktors bei der Mdm2-vermittelten Ubiquitinierung einnimmt. So bindet MdmX an Mdm2 und stimuliert z.B. die Mdm2-induzierte Ubiquitinierung von p53. Des Weiteren führt eine Verminderung der Expression von MdmX oder Mdm2 in Zellen zu einer Akkumulierung des p53-Proteins. Dies weist darauf hin, dass sowohl Mdm2 als auch MdmX in vivo aktiv am Abbau von p53 beteiligt sind. Im vorliegenden Antrag soll nun die Rolle von MdmX bei der Mdm2vermittelten Ubiquitinierung durch biochemische, molekular-biologische und zellbiologische Methoden in vitro und in Zellen im Detail charakterisiert werden. Des Weiteren sollen zelluläre Faktoren identifiziert werden, die mit MdmX und/oder dem Mdm2/MdmX-Komplex interagieren, und anschließend überprüft werden, ob diese Faktoren Ubiquitinierungssubstrate darstellen oder die Aktivität von MdmX bzw. des Mdm2/MdmX-Komplexes beeinflussen. Die vorgeschlagenen Untersuchungen werden zur Aufklärung der Mechanismen beitragen, die zum einen der Mdm2/MdmX-induzierten U biquitinierung zugrunde liegen und zum anderen die Aktivität des Mdm2/MdmX-Komplexes regulieren.

RING指蛋白Mdm 2和MdmX的结构也具有抗肿瘤抑制因子p53的功能。MDM 2是一个家庭的聚会。环指蛋白泛素化（E3）和诱导p53蛋白水解的酶，并使其失活。我的Mdm 2显示MdmX没有E3激活。通过对Mdm 2 E3活性的生物化学研究，我们发现Mdm 2的E3活性与Mdm 2的E3活性相关，而Mdm 2的E3活性与Mdm 2的E3活性相关。因此，结合MdmX和Mdm 2并刺激z.B. Mdm 2-induzierte Ubiquitinierung von p53. Des Weiteren führt eine Verminderung der Expression von MdmX or der Mdm2 in Zellen zu einer Akumulierung des p53-Proteins.因此，Mdm 2在体内也可以通过p53激活MdmX。Antrag在MdmX中的作用是通过体外生物化学、分子生物学和细胞生物学方法在Mdm 2中的泛素化，并在韦尔登中进行详细描述。Des Weiteren sollen zelluläre Faktoren identifiziert韦尔登，die mit MdmX und/oder dem Mdm2/MdmX-Komplex interagieren，and anschließend überprüft韦尔登，ob diese Faktoren Ubiquitinierungsssubstrate darstellen or der die Aktivität von MdmX bzw. Mdm 2/MdmX复合体的影响。该vorgeschlagenen Untersuchungen韦尔登zur Aufklärung der Mechanismen beitragen，die zum einen der Mdm 2/MdmX-induzierten U biquitinierung zugrunde liegen and zum anderen die Aktivität des Mdm 2/MdmX-Komplexes regulieren.