血中タンパク質ＡＩＭの活性化メカニズムの解明とそれを用いた疾患の新規治療法開発

阐明血液蛋白AIM的激活机制并开发利用其治疗疾病的新方法

• 批准号: 17J03519
• 负责人: 山崎 智子
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J03519/
• 关键词: NASH; HTS

AIMはマクロファージにより産生分泌される血中タンパク質である。健常時は、AIMはIgM五量体に結合し、AIM自体の機能は不活性化されている。しかし、非アルコール性脂肪肝性肝炎(NASH)や急性腎障害(AKI)をはじめとする特定の疾患時には、IgMからAIMが解離し活性化し、AIMのもつ疾患治療効果を発揮する。本年は以下の研究を行った。①NASH患者におけるAIMの活性化に関する解析ではNAFL、NASH、NASH由来肝癌の患者血清中の活性化AIMを測定した。その結果、NASH由来肝癌患者では、健常人やNAFL、NASH患者と比較し、有意に血中活性化AIM濃度が高値をしめした。また、肝癌診断マーカーとしての有用性を検討したところ、感度88.5%、特異度86%と、既存のウイルス性肝癌マーカーであるAlphafeto. ProteinやPIVKA-IIよりも有用性が高いことが示された。この結果は、筆頭著者として、2017年にJ Gastroenterolに論文発表した。②AKI時にAIMを活性化させる生理的活性化物質の探索では、AKI時に血中濃度が上昇しているタンパク質を調べ、それらのタンパク質について順次クローニングし、動物細胞HEK293T細胞へ強制発現させたのち精製し、ウェスタンブロッティング法にてAIMのIgMからの解離について判定を行った。その結果、数種類のタンパク質について弱いながらAIM活性化作用を認めた。③AIM活性化作用をもつ低分子の探索では、活性化AIM（IgMから解離したAIM）のみを検出するハイスループットスクリーニング系であるHomogeneous Time-Resolved FRET (HTRF)を構築した。東京大学薬学部創薬機構が所有する低分子ライブラリーの約20万個の低分子について網羅的なスクリーニングを行った。

AIM is the most important factor in the development of the disease. In normal condition, AIM binds to IgM quintessence and AIM functions are inactivated. To develop therapeutic effects of IgM dissociation and AIM activation in certain diseases such as NASH and AKI. This year, the following research was conducted. (1) Analysis of AIM activation in NASH patients and determination of AIM activation in serum of NAFL, NASH and NASH patients with liver cancer. Results: NASH originated from liver cancer patients, healthy people, NAFL, NASH patients, compared with intentional high levels of activated AIM in blood. The sensitivity and specificity of liver cancer diagnosis were 88.5% and 86% respectively. Protein PIVKA-II is highly useful. The results were published in 2017 by J Gastroenterol. (2) Exploration of physiological active substances for AIM activation during AKI, adjustment of serum concentration during AKI, sequential purification of serum concentration during AKI, determination of IgM dissociation during AKI stress in HEK293 T cells. As a result, a number of species are identified as AIM activation. 3. AIM activation: the exploration of low molecular weight; the construction of Homogeneous Time-Resolved FRET (HTRF); the development of activated AIM (IgM dissociation); and the construction of Homogeneous Time-Resolved FRET (HTRF). About 200,000 low-molecular-weight molecules were collected by the University of Tokyo's Faculty of Medicine.