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核酸搭載エクソソームによる腫瘍関連マクロファージを標的としたがん治療戦略の実証

使用负载核酸的外泌体展示针对肿瘤相关巨噬细胞的癌症治疗策略

基本信息

批准号：
17J08534
负责人：
曽宮正晴
金额：
$ 7.49万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-26 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J08534/
关键词：
エクソソーム牛乳核酸医薬マクロファージがん

项目摘要

牛乳からのエクソソーム精製について、牛乳に豊富に含まれているタンパク質成分を除くために、牛乳を酢酸で処理してタンパク質を沈殿させ、その上澄み分を超遠心によって分離することで、高度に精製したエクソソームを得ることができた。この方法は、従来報告されている牛乳からのエクソソーム精製法と比較しても、１０倍程度の純度であり、エクソソームのマーカータンパク質を豊富に含んでいることが確認できた。なお、酢酸処理および超遠心法で精製したエクソソームは、マウス静脈内へ高用量投与しても（6 mg/kg）顕著な毒性を示さずアナフィラキシー症状などを誘導しないことを確認した。つまり、牛乳エクソソームの安全性を動物試験レベルで示すことができた。また核酸内封については、独自の方法によって、牛乳エクソソーム内に効率的に核酸を内封する方法を開発することができた。従来の電気穿孔法の核酸の内封率0.1%と比較して、本研究で開発した新規法では内封効率は最大40%程度となり、非常に高い効率での核酸内封に成功したと言える。最後にマクロファージの形質変化の誘導について、M2マクロファージをM1マクロファージに変化させると従来報告されていたmiRNAを5種類購入し、マクロファージ細胞株やマウス腹腔マクロファージにトランスフェクションしてその効果を評価したが、いずれのmiRNAについてもマクロファージの表面マーカーを変化させるような結果は得られなかった。今回の実験で用いた細胞モデルが腫瘍周辺に存在しているマクロファージと異なっており、詳細な検討が必要であると考えられる。また、エクソソームによるマクロファージの標的化については、エクソソーム表面の修飾によってマクロファージへの結合能を向上させるよう試みた。エクソソームの表面にマンノースを化学的に架橋すると、マクロファージへのエクソソームの取り込みが向上することを見出した。

The milk is refined and enriched, and the quality of the milk is removed. The milk is treated with acid, and the quality of the milk is removed. The supernatant is separated from the milk. The milk is highly refined. This method is reported in the report. The purity of milk is 10 times higher than that of pure milk. The purity is 10 times higher than that of pure milk. The toxicity of the drug was confirmed by intravenous administration of 6 mg/kg of the drug. The safety of milk and milk products was tested in animals. The method of nucleic acid encapsulation is developed independently of the method of nucleic acid encapsulation. In this study, we developed a new method with a maximum efficiency of 40%. Finally, the miRNA gene was induced by M2, M1 and M2, and the miRNA gene was induced by M2 and M1. The miRNA gene was induced by M2 and M1. This time around, the cells are used to detect the presence of tumor cells, and detailed investigation is necessary. For example, if you want to improve the quality of the product, you can change the quality of the product by changing the quality of the product. The best way to get started is to build bridges.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

ドラッグデリバリーシステム-バイオ医薬品創成に向けた組織、細胞内、核内送達技術の開発

药物输送系统 - 开发用于生物制药的组织、细胞内和核内输送技术

DOI：
发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
0
作者：
曽宮正晴;黒田俊一
通讯作者：
黒田俊一

ドラッグデリバリーシステムにおけるミルク由来エクソソームの可能性

乳源性外泌体在药物输送系统中的潜力

DOI：
发表时间：
2017
期刊：
影响因子：
0
作者：
岩崎智仁;川原井圭;田上貴祥;長谷川靖洋;渡邊大裕，藤木純平，井上博紀，樋口豪紀，曽宮正晴，吉岡祐亮，落谷孝広，岩崎智仁，山口昭博，山口さより，平敏夫，岩野英知
通讯作者：
渡邊大裕，藤木純平，井上博紀，樋口豪紀，曽宮正晴，吉岡祐亮，落谷孝広，岩崎智仁，山口昭博，山口さより，平敏夫，岩野英知

生体分子 Exosome による新規核酸送達技術の開発

利用生物分子外泌体开发新型核酸递送技术