Ｓｒｃ活性制御の破綻による染色体不安定性を介した細胞のがん化・悪性化機構の解明

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本研究ではv-SrcがLATS2に与える影響を解析し、さらにv-Src発現下のLATS2の役割を探索することで、恒常的活性化Srcによる細胞のがん化・がん悪性化機構の解明を目指した。採用最終年度は、次の項目に取り組んだ。①v-SrcによりLATS2の発現量が増加する機構の探索:LATS2のmRNA量はv-Src発現により増加し、その増加がYAPのノックダウンにより有意に減少した。プロテアソーム阻害剤やオートファジー阻害剤の処理はLATS2の発現量に影響を与えず、タンパク質合成阻害剤の処理はv-Src発現の有無に関わらずLATS2の発現量を経時的に減少させた。②v-Srcがブレブ形成に与える影響の解析：ブレブの退縮に関与するEzrinをノックダウンし、v-Srcがブレブの拡大または退縮阻害、どちらに寄与するか調べた。v-Srcの発現によりブレブ形成率が増加し、その増加がEzrinのノックダウンによりさらに増加した。③v-Srcによるブレブの生理的意義の探索：ブレブがアポトーシスに特徴的な表現型であることから、v-Srcによるブレブのアポトーシスへの関与を調べた。細胞生存率はv-Srcの発現により減少したが、LATS2のノックダウンによりさらに減少することはなかった。また、v-Src発現かつLATS2ノックダウンにより誘導されたブレブ細胞では、アポトーシスの指標である活性型caspase-3の蛍光シグナルは観察されなかった。以上より、v-SrcによるLATS2発現量増加にYAPに依存的な転写活性化が関与すること、v-Srcがブレブ形成の拡大に関与することが示唆された。また、v-Srcによるブレブがアポトーシスに寄与しないことが示唆された。これまでの研究成果を学術論文（FASEB J. 2021Jan;35(1):e21242. ）に発表した。