Molecular analysis of Prader-Willi syndrome by model mice

模型小鼠普瑞德-威利综合征的分子分析

• 批准号: 21K07848
• 负责人: 木住野 達也
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07848/
• 关键词: Magel2; Snrpn; プラダーウウィリー症候群; 遺伝子改変マウス; Snord116; プラダー・ウィリー症候群; モデルマウス

ゲノム編集技術を用いてプラダー・ウィリー症候群責任領域の複数の遺伝子の遺伝子改変マウスを作製した。2021年度にはSnrpn, Snord116, Snord115の遺伝子の欠失マウスを作製したので、2022年度は新たにMkrn3,Magel2, Ndnの遺伝子改変マウスを作製した。これら各遺伝子、および複数の遺伝子をloxで挟むようにデザインした遺伝子改変マウスを作製し、cre発現マウスと交配することにより父親アレルあるいは母親アレルを欠失するようにした。母親アレルを欠失したマウスは体重増加の異常を認めなかった。父親アレルを欠失したマウスで新生児期体重増加不良を認めたのは、Magel2を含む複数の遺伝子を欠失したマウスであった。またNdn上流に存在するmicroRNAの父親由来アレルの欠失によっても新生児期体重増加不良を認めた。このmicroRNAはインプリンティングを受けており、プラダー・ウィリー症候群モデルマウスのマウス独特の表現型に関与していると考えられるが、現在詳細な解析を行っている。2021年度に作製したSnrpn exon1上流6kbからエクソン1までを欠失したマウスは新生児期致死ではなかったが、新生児期体重増加不良をみとめた。新生児期脳における遺伝子発現を定量PCR法にて解析したところSnord116の発現低下に加え、Mkrn3,Magel2, Ndnの発現の低下を認め、特にMagel2の発現の低下が体重増加不良に関与していると考えられた。一方、Snrpnイントロン1にはエンハンサーの存在が示唆されていたので、イントロン1を様々な長さで欠失させたマウスを作製した。これらのマウスの遺伝子発現解析からエンハンサー領域を特定し、Snord116、115のエンハンサーとして機能していることを、日本分子生物学会で報告した。

A number of genetic modifications to the domain of responsibility for the syndrome are required to be made by the compilation technique. In 2021, Snrpn, Snord116, Snord115 and Mkrn3,Magel2, Ndn were replaced by new ones in 2022. The father and mother of the child are not allowed to have sex. The mother lost her weight. The father lost his baby weight. The presence of microRNA in the upper reaches of the body may result in increased neonatal weight loss. The microRNA gene expression pattern is related to the unique phenotype of the gene, which is now analyzed in detail. In 2021, the production of Snrpn exon1 was 6kb. The production of Snrpn exon1 was 6kb. The production of Snrpn exon 1 was 6 kb. Quantitative PCR analysis of neonatal gene expression was performed to identify the low expression of Mkrn 3,Magel2, Ndn and the low expression of Mkrn3,Magel 2, Ndn. A party, Snrp, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 10, 11, 12, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 19, 10, The analysis of gene development in Snord116 and Snord 115 is reported by the Japanese Molecular Biology Society.