RNA regulator in breast cancer stem cells and its application to therapy

乳腺癌干细胞中的RNA调节因子及其在治疗中的应用

• 批准号: 21K19403
• 负责人: 淺原 弘嗣
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19403/
• 关键词: RNA binding protein; breast cancer; cancer stem cell

乳がんは、日本で年間9万人以上が罹患する、女性において最も頻度が高いがんである。中でもトリプルネガティブ乳がんは乳がん全体の約20%を占め、他のタイプの乳がんと異なり、十分な治療法が確立されていないため、予後不良な疾患である。トリプルネガティブ乳がんにおいてはCD44陽性CD24陰性などのマーカーで特徴づけられる乳がん幹細胞集団が存在し、治療抵抗性に寄与することが知られてきた。そこで我々は、予備実験において、TNBCのがん幹細胞において特異的に高発現するRNA結合タンパク(RBD24)を同定し、RBD24がRNA階層において、乳がん幹細胞を規定する可能性を見出した。このRBD24について本年度は以下の解析を行った。現在RBD24と共発現するような因子の探索を免疫染色とscRNAseqの再解析のデータをもとに行っている。1）RBD24のTNBC癌幹細胞の遺伝子発現プロファイルにおける機能解析：既報のscRNAseqデータの再解析を行ったところ、RBD24が乳がん幹細胞様の発現を示す細胞集団において強く発現することを明らかにした。またトリプルネガティブ乳がん患者由来の病理検体においてもRBD24の発現部位について検証を行った。2）RBD24のＲＮＡ結合能を介した分子機能解析：RBD24を発現するMDAMB231細胞を用いてPAR-CLIP解析を行うことで、RBD24が結合する標的遺伝子および塩基配列をtranscriptome wideに高解像度で同定した。特に乳がん幹細胞性を制御する上で重要な遺伝子の3’UTR上の特定のcis-element配列に結合することで標的遺伝子のmRNAを安定化させることを明らかにした。特にこのcis-elementをもつ領域を含む3’UTRを搭載したレポーターを用いてRBD24によるレポーター活性の変化を計測したところ、RBD24の発現によるレポーター活性の上昇が明らかとなった。

In Japan, more than 90,000 people are が affected by する in で years, and the frequency of the disease among women is the highest in が が がんである がんである. In で も ト リ プ ル ネ ガ テ ィ ブ milk が ん は milk が ん all accounts for about 20% を の め, he の タ イ プ の milk が ん と different な り, very が な therapy establish さ れ て い な い た め, after to adverse な disorders で あ る. ト リ プ ル ネ ガ テ ィ ブ milk が ん に お い て は CD44 positive CD24 negative な ど の マ ー カ ー で, 徴 づ け ら れ る milk が ん stem cell collection 団 が し, treatment resistance に send す る こ と が know ら れ て き た. そ こ で I 々 は, reserve be 験 に お い て, TNBC の が ん stem cells に お い て high specific に 発 now す る rna-binding タ ン パ ク (RBD24) を し, RBD24 が RNA class に お い て, milk が ん stem cells を rules す る を likely see the し た. <s:1> <s:1> RBD24に に に て て て this year に the following <s:1> analysis を line った. Now RBD24 と 発 now total す る よ う な factor の explore を immune dyeing と scRNAseq の to の デ ー タ を も と に line っ て い る. 1) RBD24 の TNBC traces of cancer stem cells の 伝 son 発 now プ ロ フ ァ イ ル に お け る function resolution: both the の scRNAseq デ ー タ の line to を っ た と こ ろ, RBD24 が milk が ん stem cells others の 発 now を す cells sets 団 に お い て strong く 発 now す る こ と を Ming ら か に し た. ま た ト リ プ ル ネ ガ テ ィ ブ milk が ん origin の patients with pathological 検 body に お い て も RBD24 の 発 now parts に つ い て 検 line card を っ た. 2) RBD24 の RNA binding energy を interface し た molecular function: RBD24 を 発 now す る MDAMB231 cells を using い て PAR - CLIP line analytical を う こ と で, RBD24 が combining す る mark heritage 伝 son お よ び salt base with column を transcriptome wide に high resolution で with fixed し た. Special に milk が ん stem cell sex を suppression す る で important な heritage 伝 son の on 3 'UTR の specific の cis - element with column に combining す る こ と で mark heritage 伝 son の mRNA を stabilization さ せ る こ と を Ming ら か に し た. Special に こ の cis - element を も を つ field containing む 3 'UTR を carry し た レ ポ ー タ ー を with い て RBD24 に よ る レ ポ ー タ の ー activity - the を measuring し た と こ ろ, RBD24 の 発 now に よ る レ ポ ー タ ー active の rise が Ming ら か と な っ た.

项目成果

RNA階層における軟骨組織発生と恒常性制御機構と治療への応用Cartilage development and homeostasis via RNA regulation、シンポジウム25（運動器疾患における再生医療の最前線）

通过 RNA 调节实现软骨发育和稳态，研讨会 25（肌肉骨骼疾病再生医学的前沿）

• 发表时间: 2022
• 作者: 淺原弘嗣

脊椎椎間板におけるMkxの機能解析、シンポジウム講演（脊椎関節炎の経時的病態を探究する）

椎间盘中 Mkx 的功能分析，研讨会讲座（探索脊柱关节炎的颞部病理学）

• 发表时间: 2021
• 作者: 淺原弘嗣;中道亮;堤大樹;栗本遼太
• 通讯作者: 栗本遼太

東京医科歯科大学 システム発生・再生医学分野

东京医科齿科大学系统开发再生医学系

メカノ刺激と運動能力の制御、シンポジウム講演（メカノトランスフォーメーション（MX) - 力学刺激と細胞・組織制御への展開）

运动表现的机械刺激和控制，研讨会讲座（机械转化（MX）-机械刺激和细胞/组织控制的发展）

• 发表时间: 2022
• 作者: 淺原弘嗣;淺原弘嗣
• 通讯作者: 淺原弘嗣

骨格筋における遺伝子発現制御機構の最前線

骨骼肌基因表达控制机制的前沿

• 发表时间: 2021
• 作者: Kaneko N;Nakamura S;Sawamoto K;淺原弘嗣
• 通讯作者: 淺原弘嗣