へパラン硫酸の糖鎖構造：iPS細胞分化シグナルの選択的制御

硫酸乙酰肝素的聚糖结构：iPS 细胞分化信号的选择性调节

• 批准号: 22K06801
• 负责人: 小林 孝
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Aichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06801/
• 关键词: iPS細胞; ヘパラン硫酸; 細胞分化; プロテオグリカン

ヘパラン硫酸は細胞外マトリックスや細胞表層に局在するグリコサミノグリカンで、多様な生理活性分子と特異的に結合することにより、そのシグナル伝達を制御している。幹細胞から各種組織細胞への分化過程でヘパラン硫酸の修飾・生合成酵素遺伝子には著しい発現変動がみられ、それに伴いヘパラン硫酸の構造も目覚ましい変化を遂げる。そこで本研究では、ヒトiPS細胞の各細胞分化過程でのヘパラン硫酸の構造解析、ヘパラン硫酸と結合すると想定される生理活性分子の同定、ゲノム編集等によるヘパラン硫酸の人為的構造変化によって各細胞系譜におけるHSの糖鎖構造の機能を明らかにする。2022年度は１）CRISPR/Cas9法によってヘパラン硫酸の硫酸転移酵素HS2ST、HS6ST1、HS6ST2のノックアウトiPS細胞株の樹立を試み、HS2STとHS6ST2のノックアウト株を樹立した。２）心臓組織を構成する心外膜平滑筋細胞、心外膜線維芽細胞および肝臓組織を構成する肝実質細胞、肝星細胞の分化誘導法を確立した。

In addition, the expression of a variety of physiologically active molecules and specific binding proteins in the extracellular and surface layers of cells can be controlled. Stem cells are transformed from various tissues and cells into cells that are modified by enzymes and enzymes. In this study, we aim to clarify the structural analysis, binding, identification, and compilation of physiologically active molecules in the differentiation process of iPS cells, as well as the artificial structural transformation of iPS cells, and the function of HS glyco-lock structure. In 2022, the CRISPR/Cas9 method was used to test the establishment of iPS cell lines, HS2ST, HS6ST1 and HS6ST2. 2) Establishment of differentiation induction method for epicardial smooth muscle cells, epicardial vascular buds and liver tissue.