高内皮細静脈の可塑的な形質変化におけるヘパラン硫酸の機能解明

阐明硫酸乙酰肝素在高内皮微静脉塑性变化中的功能

• 批准号: 14J07438
• 负责人: 坪井 康一郎
• 金额: $ 1.39万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J07438/
• 关键词: 糖鎖; 高内皮細静脈; 血管内皮; HEV

免疫誘導時における高内皮細静脈の可塑的な形質変化とその機能を明らかにするため、ハプテン誘導性接触性皮膚炎を実施し、リンパ節凍結切片を作製し、数種類の抗糖鎖抗体で染色した。その結果、免疫応答後、経時的に 6-sulfo sialyl Lewis X糖鎖構造が減少し、MAdCAM－1 が高内皮細静脈上に発現することを確かめた。さらに、ある糖鎖構造が高内皮細静脈でない血管内皮において恒常的に発現することを見出した。リンパ節内において、高内皮細静脈でない血管内皮で当該糖鎖構造が恒常的に発現する知見を元に、血管内皮細胞が豊富な肺に着目した。 肺組織消化物を抗糖鎖抗体で染色しFACS解析を行った。その結果、当該糖鎖が一般的な血管内皮である肺血管内皮細胞にも発現することを見出した。注目した糖鎖構造が血管内皮細胞において発現することはこれまでに報告がなく、この点において新たな知見を得たと考え、血管内皮における当該糖鎖の発現についてさらに解析を進めた。上記の研究で使用したマウス系統(C57BL/6)以外のマウス系統(Balb/c)でも上記と同様な実験を行ったところ、同様な結果が得られた。従って、マウス系統によらず血管内皮において当該糖鎖構造が発現することが示唆されたさらに、当該糖鎖構造の生合成に関わると考えられる幾つかの糖転移酵素欠損マウスを用意し、肺血管内皮の FACS 解析を行うことで、当該糖鎖構造の生合成に関わる酵素を推定した。また、セルソーターを用いて当該糖鎖を発現する血管内皮を高純度で精製可能な実験系を樹立した。今後、当該糖鎖構造の生合成酵素欠損マウスや当該糖鎖構造に対する抗体を活用することによって、血管内皮における当該糖鎖構造の機能を明らかにし、創薬に繋がる知見が得られると考えられる。

为了澄清免疫诱导期间高内皮静脉的塑性性状变化及其功能，进行了触觉诱导的接触性皮炎，制备了淋巴结冷冻切片，并用几种类型的抗糖基化抗体染色。结果，已经证实，免疫反应后的6-硫硫醇LEWIS X糖基化结构随时间降低，MADCAM-1在高内皮静脉上表达。此外，发现某些糖基化结构在血管内皮中组成型表达，这不是高度内皮静脉。基于这样的发现，即在血管内皮中不断表达聚糖结构，这不是高内皮静脉，我们专注于富含血管内皮细胞的肺。用抗聚糖染色肺组织摘要，并进行FACS分析。结果，发现聚糖也在肺血管内皮细胞中表达，这是常见的血管内皮。没有关于血管内皮细胞中注意到的聚糖结构表达的报道，并且我们认为在这方面已经获得了新的发现，并且对血管内皮中血糖表达的表达进行了进一步分析。除了上述研究（C57BL/6）以外，对小鼠菌株（BALB/C）进行了类似的实验，并获得了类似的结果。 Therefore, it was suggested that the glycan structure is expressed in the vascular endothelium regardless of the mouse strain, and in addition, several glycosyltransferase-deficient mice that are thought to be involved in the biosynthesis of the glycan structure were prepared, and FACS analysis of the pulmonary vascular endothelium was performed to estimate the enzymes involved in the biosynthesis of the glycan structure.此外，还建立了一个实验系统，该系统允许使用细胞分选蛋白纯净的糖链表达糖链的血管内皮。人们认为，通过利用具有生物合成酶的小鼠在聚糖结构中缺乏酶和对聚糖结构的抗体，将阐明血管内皮中的聚糖结构的功能，并且将获得导致药物发现的知识。

项目成果

オートファジー関連遺伝子Atg7は腸内細菌叢を制御し大腸炎を抑制する

自噬相关基因 Atg7 控制肠道菌群并抑制结肠炎

• 发表时间: 2015
• 作者: 坪井康一郎;西谷麻予;今井康之;小松雅明;川島博人
• 通讯作者: 川島博人