新規転移阻害タンパク質の機能解析を通した癌細胞遊走能調節の分子基盤の解明

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令和４年度において、ダイカルシンによる癌細胞の遊走能阻害の分子基盤を解析することを目的とし、下記の成果を得た。1. GM1b以外のダイカルシンの標的分子を同定するために、OV2944細胞抽出物を二次元電気 泳動後メンブレンにブロットし、蛍光標識ダイカルシンと反応させた。複数の標的候補分子が検出され、それらの質量分析を試みている。2.ダイカルシンによるマトリクスメタロプロテアーゼ(MMP)活性への影響について解析した。ダイカルシンを細胞外から投与したOV2944細胞とコントロールOV2944細胞を調整し、泳動ゲル中にMMPの基質であるゼラチンを含んだゼラチンゲルを利用したゼラチンザイモグラフィーを行ったところ、ダイカルシン投与により、MMP2およびMMP9の活性が有意に低下することを示唆する結果を得た。3.ダイカルシンが転移阻害作用を示す癌種を検索するために、様々な種類の細胞株を使用し、ダイカルシンの遊走能阻害効果をin vitro浸潤アッセイにより解析した。前立腺癌(PC3)および結腸癌(COLO320M)など複数の細胞株において、ダイカルシンが遊走能阻害効果を示した。