機能変異インテグリン導入によるがん細胞遊走能および転移能の解析

引入功能突变整合素分析癌细胞迁移和转移能力

• 批准号: 12215094
• 负责人: 冨山 佳昭
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215094/
• 关键词: インテグリン; 細胞遊走能; リガンド結合能; 機能活性化変異; 機能欠失変異; IAP; CD47

インテグリンを介した細胞接着および細胞内外への情報伝達経路は腫瘍の増大、浸潤および転移能、さらには腫瘍血管新生において中核をなすことが明らかにされつつある。従って、腫瘍増大、浸潤および転移能の分子機構の解明には、その初期のイベントとしてのインテグリンを介した情報伝達機構の解明が必要不可欠であると考えられる。本研究はこの初期イベントを制御すべくβ3インテグリンを中心にその構造-機能連関と情報伝達機構ならびに細胞機能への作用を解明することを目的としており、主として申請者らが新規同定した機能活性化変異および機能欠失変異を中心に解析した。まず機能活性化変異αvβ3(β3Thr562Asp)導入CHO-K1細胞では各種リガンドにたいする接着能が亢進するものの、細胞遊走能は野生型に較べ逆に低下していた。さらにαvの機能部位を同定すべく、βプロペラモデルにおけるW34-1ループおよびW32-3ループにおけるアラニン変異実験によりαvの機能部位としてW32-3ループ内の178Tyrが必須であることを新たに同定した。この機能欠失変異導入によりαvβ3は可溶化リガンド結合能だけでなく、固相化リガンドに対する接着能も消失した。さらにこの機能欠失変異はドミナントネガティブに細胞接着や細胞増殖も抑制するとの成績を得つつあり現在その詳細を解析中である。一方、Integrin-associated protein(IAP)/CD47の機能を明らかにするため機能活性化抗体であるB6H12を用いて解析し、IAPからのシグナルはB細胞株においてlamellipodiaを誘導しβ1インテグリン依存性の細胞遊走能を亢進させること、またその作用はCDC42を介していることを明らかにした。

Cell adhesion and intracellular and extracellular information transmission pathways increase tumor size, infiltration and migration, and tumor angiogenesis. The molecular mechanism of migration, swelling, infiltration and migration is necessary to understand the initial stage of migration. This study focuses on the analysis of structure-function linkage, information mechanism and cellular function in the initial stage of the study. The expression of αvβ3(β3Thr562Asp) in CHO-K1 cells was significantly higher than that in wild type cells. In addition, the functional parts of αv are the same as those of β, and the functional parts of αv are the same as those of W34-1 and W32 -3. The function of this function is not different from that of αvβ3, which can be dissolved and combined with the solid phase. The function of the cell is not different from that of the cell growth inhibition. The function of Integrin-associated protein(IAP)/CD47 is clearly demonstrated by the functional activation of antibodies against B6H12 and the role of IAP in inducing β1-dependent cell migration in B cell lines mediated by CD42.

项目成果

Honda S,Tomiyama T et al: "Ligand binding to integrin αvβ3 requires tyrosine 178 in the αv subunit."Blood. 97. 175-182 (2001)

Honda S、Tomiyama T 等人：“与整合素 αvβ3 结合的配体需要 αv 亚基中的酪氨酸 178。”Blood. 97. 175-182 (2001)

Yokota T,Oritani K,Tomiyama Y, et al: "Adiponectin, a new member of the family of soluble defense collagens, negatively regulates the growth of myelomonocytic progenitors and the tunctions of macrophages"Blood. 96. 1723-1732 (2000)

Yokota T、Oritani K、Tomiyama Y 等人：“脂联素是可溶性防御胶原蛋白家族的新成员，对骨髓单核细胞祖细胞的生长和巨噬细胞的功能具有负调节作用”血液。

Yoshida H, Tomiyama Y, et al.: "Integrin-associated protein/CD47 regulates motile activity in human B cell lines through CDC42"Blood. 96. 234-241 (2000)

Yoshida H、Tomiyama Y 等人：“整合素相关蛋白/CD47 通过 CDC42 调节人 B 细胞系的运动活性”Blood。

Ogawa M,Nishiura T,Tomiyama Y, et al: "Cytokines prevent dexamethasone-induced apoptosis via the actiyation of mitogen-activated protein kinase and phosphatidylinositol 3-kinase pathways in a new multiple myeloma cell line."Cancer Res. 60. 4262-4269 (2000

Okawa M、Nishiura T、Tomiyama Y 等人：“在新的多发性骨髓瘤细胞系中，细胞因子通过丝裂原激活蛋白激酶和磷脂酰肌醇 3 激酶途径的激活来防止地塞米松诱导的细胞凋亡。”Cancer Res。

Tomiyama Y: "Glanzmann thrombasthenia : integrin αIIbβ3 deficiency. (A review)"Int J Hematol. 72. 448-454 (2000)

Tomiyama Y：“Glanzmann 血小板无力症：整合素 αIIbβ3 缺乏症。（综述）” Int J Hematol。72. 448-454 (2000)