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Ras変異体が誘導する新規細胞遊走シグナルの分子基盤とがん悪性化への影響の解明

阐明 Ras 突变体诱导的新型细胞迁移信号的分子基础及其对癌症恶性肿瘤的影响

基本信息

批准号：
22K06903
负责人：
太田聡
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06903/
关键词：
Ras MerTK STK38 細胞遊走がんの悪性化 ARHGAP18 がん

项目摘要

Ras遺伝子の変異は多くのがんの原因となる。これまでに既知Rasシグナルを標的とする抗がん剤では、Rasシグナルを完全に抑えることはできておらず、未知のRasシグナルの同定が期待されている。申請者らはがん化型Ras変異体がIL-33依存的に受容体型チロシンキナーゼMerTKの発現を誘導して細胞遊走を亢進させることを報告した。また、質量分析計を用いてMerTK結合タンパク質としてSTK38とARHGAP18を同定した。本課題は、MerTK結合タンパク質に焦点をあて、Ras/IL-33/MerTK経路による細胞遊走亢進の分子機構を解明することを目的とし、本年度はセリン・トレオニンキナーゼであるSTK38のRasシグナルに対する影響を検討した。MerTKとSTK38を発現させたHEK293細胞について免疫沈降実験を行い、免疫沈降産物についてイムノブロットを行った結果、MerTKとSTK38の細胞内相互作用が確認された。また、マウス線維芽細胞NIH-3T3を用いたボイデンチャンバー法による解析から、Rasによる細胞遊走亢進がSTK38の発現抑制により抑制されることが示された。さらに、STK38のMerTKのチロシンリン酸化に対する影響を検討するため、NIH-3T3細胞に発現させたFLAG-MerTKを細胞抽出液から免疫沈降して抗リン酸化抗体でイムノブロットしたところ、STK38の発現を抑制した細胞ではMerTKのチロシンリン酸化が抑制されることがわかった。このMerTKのチロシンリン酸化の抑制は野生型STK38の発現によりレスキューされたが、キナーゼ活性を欠損させたSTK38変異体の発現ではレスキューされなかった。以上のことからSTK38はMerTKのチロシンリン酸化を促進し、Ras/IL-33/MerTK経路が誘導する細胞遊走を促進すると考えられる。

The reason why Ras is different from others is that it is different from others. This is the case with known Ras, Ras and Ras. The applicant reported that the discovery of an IL-33-dependent receptor-type variant of Ras can induce enhanced cell migration. The quality of the product is determined by MerTK and STK38. This project aims to investigate the effects of Ras/IL-33/MerTK on the molecular mechanism of cellular hyperactivity. MerTK and STK38 were detected in HEK293 cells, and the results of immunoprecipitation products were confirmed by intracellular interaction between MerTK and STK38. The expression of STK38 in NIH-3T3 cells was inhibited by the expression of STK38. In addition, STK38 MerTK production was inhibited by FLAG-MerTK in NIH-3T3 cells. The presence of mercuric acid in the wild type STK38 was inhibited by the presence of mercuric acid in the wild type STK38. STK38 promotes cell migration induced by MerTK and Ras/IL-33/MerTK pathway.