Ras変異体が誘導する新規細胞遊走シグナルの分子基盤とがん悪性化への影響の解明

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Ras遺伝子の変異は多くのがんの原因となる。これまでに既知Rasシグナルを標的とする抗がん剤では、Rasシグナルを完全に抑えることはできておらず、未知のRasシグナルの同定が期待されている。申請者らはがん化型Ras変異体がIL-33依存的に受容体型チロシンキナーゼMerTKの発現を誘導して細胞遊走を亢進させることを報告した。また、質量分析計を用いてMerTK結合タンパク質としてSTK38とARHGAP18を同定した。本課題は、MerTK結合タンパク質に焦点をあて、Ras/IL-33/MerTK経路による細胞遊走亢進の分子機構を解明することを目的とし、本年度はセリン・トレオニンキナーゼであるSTK38のRasシグナルに対する影響を検討した。MerTKとSTK38を発現させたHEK293細胞について免疫沈降実験を行い、免疫沈降産物についてイムノブロットを行った結果、MerTKとSTK38の細胞内相互作用が確認された。また、マウス線維芽細胞NIH-3T3を用いたボイデンチャンバー法による解析から、Rasによる細胞遊走亢進がSTK38の発現抑制により抑制されることが示された。さらに、STK38のMerTKのチロシンリン酸化に対する影響を検討するため、NIH-3T3細胞に発現させたFLAG-MerTKを細胞抽出液から免疫沈降して抗リン酸化抗体でイムノブロットしたところ、STK38の発現を抑制した細胞ではMerTKのチロシンリン酸化が抑制されることがわかった。このMerTKのチロシンリン酸化の抑制は野生型STK38の発現によりレスキューされたが、キナーゼ活性を欠損させたSTK38変異体の発現ではレスキューされなかった。以上のことからSTK38はMerTKのチロシンリン酸化を促進し、Ras/IL-33/MerTK経路が誘導する細胞遊走を促進すると考えられる。