Ras変異体が誘導する新規細胞遊走シグナルの分子基盤とがん悪性化への影響の解明

阐明 Ras 突变体诱导的新型细胞迁移信号的分子基础及其对癌症恶性肿瘤的影响

• 批准号: 22K06903
• 负责人: 太田 聡
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06903/
• 关键词: Ras; MerTK; STK38; 細胞遊走; がんの悪性化; ARHGAP18; がん

Ras遺伝子の変異は多くのがんの原因となる。これまでに既知Rasシグナルを標的とする抗がん剤では、Rasシグナルを完全に抑えることはできておらず、未知のRasシグナルの同定が期待されている。申請者らはがん化型Ras変異体がIL-33依存的に受容体型チロシンキナーゼMerTKの発現を誘導して細胞遊走を亢進させることを報告した。また、質量分析計を用いてMerTK結合タンパク質としてSTK38とARHGAP18を同定した。本課題は、MerTK結合タンパク質に焦点をあて、Ras/IL-33/MerTK経路による細胞遊走亢進の分子機構を解明することを目的とし、本年度はセリン・トレオニンキナーゼであるSTK38のRasシグナルに対する影響を検討した。MerTKとSTK38を発現させたHEK293細胞について免疫沈降実験を行い、免疫沈降産物についてイムノブロットを行った結果、MerTKとSTK38の細胞内相互作用が確認された。また、マウス線維芽細胞NIH-3T3を用いたボイデンチャンバー法による解析から、Rasによる細胞遊走亢進がSTK38の発現抑制により抑制されることが示された。さらに、STK38のMerTKのチロシンリン酸化に対する影響を検討するため、NIH-3T3細胞に発現させたFLAG-MerTKを細胞抽出液から免疫沈降して抗リン酸化抗体でイムノブロットしたところ、STK38の発現を抑制した細胞ではMerTKのチロシンリン酸化が抑制されることがわかった。このMerTKのチロシンリン酸化の抑制は野生型STK38の発現によりレスキューされたが、キナーゼ活性を欠損させたSTK38変異体の発現ではレスキューされなかった。以上のことからSTK38はMerTKのチロシンリン酸化を促進し、Ras/IL-33/MerTK経路が誘導する細胞遊走を促進すると考えられる。

The reason for the large number of <s:1> variations of the 伝 offspring of Ras is となる. こ れ ま で に already know the Ras シ グ ナ ル を mark と す る resistance が ん tonic で は, Ras シ グ ナ ル を completely に え suppression る こ と は で き て お ら ず, unknown の Ras シ グ ナ ル の with fixed が expect さ れ て い る. Applicants ら は が ん mineralization type Ras - variant が IL - 33 dependent に by capacity size チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ MerTK の 発 now を induced し て cell wandering を hyperthyroidism さ せ る こ と を report し た. ま た, quality analysis meter を with い て MerTK combining タ ン パ ク qualitative と し て STK38 と ARHGAP18 を with fixed し た. This topic は, as well as the combination of MerTK タ ン パ ク qualitative に focus を あ て, Ras/IL - 33 / MerTK 経 road に よ る cell migration of hyperthyroidism の molecular institutions を interpret す る こ と を purpose と し, this year's は セ リ ン · ト レ オ ニ ン キ ナ ー ゼ で あ る STK38 の Ras シ グ ナ ル に す seaborne る influence を beg し 検 た. MerTK と STK38 を 発 now さ せ た HEK293 cells に つ い て immune sink be 験 product line を い, immune sink に つ い て イ ム ノ ブ ロ ッ ト を line っ た results, MerTK と STK38 の cell interaction が confirm さ れ た. ま た, マ ウ ス line NIH 3 t3 を d bud cells with い た ボ イ デ ン チ ャ ン バ ー method に よ る parsing か ら, Ras に よ る cell migration of hyperthyroidism が STK38 の 発 now inhibit に よ り inhibit さ れ る こ と が shown さ れ た. さ ら に, STK38 の MerTK の チ ロ シ ン リ ン acidification に す seaborne る influence を beg す 検 る た め, NIH 3 t3 cells に 発 now さ せ た FLAG - MerTK を cell extract か ら immune sink し て resistance リ ン acidification antibody で イ ム ノ ブ ロ ッ ト し た と こ ろ, STK38 の 発 now を inhibit し た cells で は MerTK Youdaoplaceholder0 チロシ リ リ リ が acidification が inhibition される った とがわ った った. こ の MerTK の チ ロ シ ン リ ン acidification の inhibit は wild-type STK38 の 発 now に よ り レ ス キ ュ ー さ れ た が, キ ナ ー ゼ active を owe loss さ せ た STK38 - variant の 発 now で は レ ス キ ュ ー さ れ な か っ た. Above の こ と か ら STK38 は MerTK の チ ロ シ ン リ ン acidification を promote し, Ras/IL - 33 / MerTK 経 road が induced す る cells wander を promote す る と exam え ら れ る.

项目成果

Ras変異体が誘導する細胞遊走シグナルにおけるSTK38/NDR1の役割

STK38/NDR1 在 Ras 突变体诱导的细胞迁移信号中的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 太田聡;多胡憲治;松儀実広;柳澤健;冨永薫
• 通讯作者: 冨永薫