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新規ゲノム改変技術による脊椎動物左右非対称性形成機構の解析

利用新型基因组修饰技术分析脊椎动物左右不对称形成机制

基本信息

批准号：
13J04914
负责人：
太田聡
金额：
$ 2.76万
依托单位：
University of Yamanashi
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-26 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までにcalcyphosine-like a (capsla), Ras association domain family member 7b (rassf7b), retinol binding protein 7a (rbp7a), zgc110373の4遺伝子についてゲノム編集ツールのTranscription activator-like effector nuclease (TALEN)によりゼブラフィッシュ変異体を作製した。また、ゼブラフィッシュにはcapslaのパラログ遺伝子であるcapslbが存在するためcapsla/capslbの二重変異体を作製した。しかしながら、これらの変異体で左右非対称性に顕著な異常は観察されていなかった。本年度はcapsla/capslb変異体の継代を続けることでmaternal-zygotic capsla/capslb二重変異体を作製したが、この変異体においても顕著な左右非対称性の異常は認められなかった。2013年、細菌や古細菌の獲得免疫機構であるCRISPR/Cas9システムを利用したゲノム編集が発表されたことを受け、私たちも独自にCRISPR/Cas9システムを立ち上げた。CRISPR/Cas9システムはTALENと比較してもメリットの多いゲノム編集ツールであり、昨年度からCRISPR/Cas9システムを利用してやはりKupffer’s vesicleに発現するF-box protein 16 (fbxo16)とregulator of G-protein signaling 3a (rgs3a)の変異体作製に取り組んでいた。本年度はfbxo16変異体系統とrgs3a変異体系統を樹立した。しかしながら、どちらの変異体もホモ変異体においても顕著な異常が見られなかったためmaternal-zygotic fbxo16変異体とmaternal-zygotic rgs3a変異体を作製した。maternal-zygotic変異体についても顕著な左右非対称性の異常は認められなかったため、Fbxo16およびRgs3aは胚発生初期には重要な役割を果たしていない、あるいはその機能は他の遺伝子によって補われていると結論付けた。

Last year, four genes, calcyphosine-like a (capsla), Ras association domain family member 7b (rassf 7b), retinol binding protein 7a (rbp7a), zgc110373, were identified. Capsla and Capslb are two different species. This is the first time I've ever seen a woman who's been in a relationship with someone else. This year, the capsla/capslb variant is replaced by the maternal-zygotic capsla/capslb variant. In 2013, bacteria and archaea acquired immune mechanisms to use CRISPR/Cas9 system to compile and develop the system independently. CRISPR/Cas9 gene expression system was developed by TALEN, F-box protein 16 (fbxo16) and regulator of G-protein signaling 3a (rgs3a). Fbxo16 and rgs3a are different systems. The first is to change the language, the second is to change the language, the third is to change the language, the fourth is to change the language. Maternal-zygotic heteromorphism is the result of the important service in the early stage of embryo development. The function of the heteromorphism is the complement of the heteromorphism.