新型コロナウイルスのnsp1依存性細胞傷害機構の解明とレプリコンモデルへの応用

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新型コロナウイルス（SARS-CoV-2）治療薬としてモルヌピラビルやニルマトレルビルなどが使用されているが、薬剤耐性株の出現リスクに備えて、SARS-CoV-2増殖メカニズムに基づいた新たな抗ウイルス薬開発の継続が必要と考えられる。これまで、研究代表者らは、BSL2レベルでの大規模なウイルス複製阻害薬の探索に適した細胞モデルとして、SARS-CoV-2レプリコン発現系を開発した。しかしながら、同レプリコンは細胞傷害性が強いため、限られた細胞株でしかレプリコン安定発現細胞の樹立が出来ないという問題があった。そこで本研究課題では、SARS-CoV-2複製による細胞傷害メカニズムを解明し、非細胞傷害性レプリコン発現モデルの開発と、それを用いたウイルス複製の解析系およびスクリーニング系を確立することを目的とした。これまでの知見から、SARS-CoV-2の非構造タンパク質nsp1はリボソームの働きを阻害することにより宿主遺伝子の翻訳を阻害することが分かっている。そのため本研究課題では、ウイルス複製による細胞傷害の主因としてnsp1による翻訳阻害が関係すると考え、nsp1による細胞傷害のメカニズムの解析を行っている。また、nsp1遺伝子に変異を導入することにより、翻訳阻害を引き起こさない変異型nsp1を発現するレプリコン発現ベクターを作製し、その細胞傷害性やレプリコン複製活性への影響の解析を進めている。これらの解析を進展させ、薬剤耐性株のウイルス複製評価などが可能な新たなSARS-CoV-2複製解析モデルを確立したいと考えている。