A replicon-based screen of yellow fever virus host factors: Toward generation of highly productive virus-producer cell lines
基于复制子的黄热病病毒宿主因子筛选:旨在产生高产病毒生产细胞系
基本信息
- 批准号:21K06571
- 负责人:
- 金额:$ 2.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
代表者はこれまでに、黄熱ウイルス(YFV)17D株のRNA複製能をレポーター発現で評価できるサブゲノミックレプリコンを構築している。本研究では、当該レプリコンを用いて、①YFVの複製に関与する宿主因子を見出すことにより、YFV17D高生産性Vero細胞を作出すること、②YFVのゲノム複製機構の手がかりを得ることを目的としている。これまでにYFV17Dのサブゲノミックレプリコンが持続的に複製されるVero細胞(レプリコン細胞)を樹立し、今年度はその性状解析に関する論文を発表した。レプリコンは構造遺伝子の代わりにGFP融合ゼオシン耐性遺伝子をコードしているので、レプリコンの複製をGFP蛍光でモニターすることができる。Vero細胞以外にヒト肝がん由来Huh7.5.1-8細胞でも同様のレプリコン細胞を作製し、特性解析を行ったところ、当該レプリコン細胞はVeroレプリコン細胞よりも抗ウイルス薬剤に対する感受性が高く、抗ウイルス薬物スクリーニングに有用であることがわかった。またヒト由来という点は遺伝学的スクリーニングにもメリットがあり、今後はVeroとHuh7.5.1-8の2種のレプリコン細胞を補完的に使用していくのが良いと考えられた。また、YFV感染がもたらす細胞内構造変化をアポダイズド位相差・蛍光顕微鏡で解析したところ、感染に特徴的なオルガネラ膜の時間変化を捉えることができた。今後、複製に関わる膜構造の形成因子を解析する際には、当該顕微鏡を用いたイメージングが有用であると考えられた。
The representative expressed his opinion on the RNA replication ability of YFV 17D strain. In this study, we found that: (1) host factors related to YFV replication were found;(2) YFV replication mechanisms were found;(3) YFV 17D highly productive Vero cells were found; and (4) YFV replication mechanisms were found. This paper presents the establishment of Vero cells for the replication of YFV17D and the analysis of its characteristics. The GFP fusion gene and the GFP resistant gene are cloned into the GFP fusion gene and cloned into the GFP fusion gene. In addition to Vero cells, the same Lepregulin cells can be produced from Huh7.5.1 - 8 cells and analyzed for their characteristics. When the Lepregulin cells are compared to Vero Lepregulin cells, they have high sensitivity to anti-cancer drugs and are useful in anti-cancer drug therapy. The origin of the virus is the origin of the virus, and the future of Vero Huh7.5.1 - 8 is the origin of the virus. YFV infection is characterized by intracellular structural changes, phase differences, and temporal changes in the membrane. In the future, when analyzing the formation factor of the film structure, the micro-mirror will be useful.
项目成果
期刊论文数量(4)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
黄熱ウイルス17D株サブゲノミックレプリコンを持続的に保持するVero細胞の特性解析
持续保留黄热病病毒 17D 株亚基因组复制子的 Vero 细胞的表征
- DOI:
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:齊藤恭子;島﨑健太朗;深澤征義;鈴木亮介;中村(桶本)優子;加藤薫;高崎智彦;花田賢太郎
- 通讯作者:花田賢太郎
Vero細胞における黄熱ウイルス17D株サブゲノミックレプリコンの持続的な複製の性状解析
黄热病病毒株 17D 亚基因组复制子在 Vero 细胞中持续复制的表征
- DOI:
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:齊藤恭子;深澤征義;鈴木亮介;高崎智彦;花田賢太郎
- 通讯作者:花田賢太郎
Establishment of Vero cell lines persistently harboring a yellow fever virus 17D subgenomic replicon
- DOI:10.1016/j.virusres.2022.198935
- 发表时间:2022-10-20
- 期刊:
- 影响因子:5
- 作者:Saito,Kyoko;Shimasaki,Kentaro;Hanada,Kentaro
- 通讯作者:Hanada,Kentaro
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齊藤 恭子其他文献
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11239204 - 财政年份:1999
- 资助金额:
$ 2.58万 - 项目类别:
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