間葉系幹細胞/間質細胞株（ASCL）細胞シートによる血管内膜肥厚の抑制

使用间充质干细胞/基质细胞系（ASCL）细胞片抑制血管内膜增厚

• 批准号: 22K08944
• 负责人: 松原 健太郎
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08944/
• 关键词: 間葉系幹細胞; 血管内膜肥厚; 細胞シート; ASCL

ラット皮下脂肪組織より採取した細胞から間葉系幹細胞／ 間質細胞株（Adipose-derivedMesenchymal Stem/stromal Cell Line：ASCL）の前駆細胞である間葉系幹細胞／ 間質細胞（Adipose-derived Mesenchymal Stem/stromal Cell： ASC）を分離し、ヒトASCLの作製技術を用いてラットASCLを樹立し、ラットASCとラットASCLのそれぞれの細胞性質を評価した。細胞表面分子の発現をフローサイトメトリーで評価した結果、ラットASCとラットASCLのいずれもCD44とCD90は陽性、CD45とCD34は陰性であった。また分化能の評価では、ラットASCとラットASCLのいずれも脂肪細胞あるいは骨芽細胞への分化能を有することを確認し得た。これらから今回作成したラットASC、ラットASCLのいずれも間葉系幹細胞の条件を満たすと判断した。温度応答性細胞培養皿を用いたラットASCLの単層細胞シート作製においては、安定した単層シートの作成に向けて、細胞数や低温処理時間などの調整繰り返した。最終的には細胞数を増やし、低温処理時間を延長することで、比較的安定して単層シートを作製可能となった。ラット腹部大動脈擦過モデルの作成に関しては、予備実験を行い、ラットの麻酔管理や開腹手技、大動脈・腸骨動脈の解剖の把握、またバルーンカテーテル挿入の練習を行った。

The isolation and production of Mesenchymal Stem/stromal cells (ASCL) from subcutaneous fat Cell and the characterization of ASCL Cell were evaluated. Cell surface molecular expression is negative for CD44 and CD90, but positive for ASC and ASCL. The ability to differentiate between adipocytes and osteoblasts has been identified. The condition of stem cells in vitro was determined by the method of ASC and ASCL. Temperature responsive cell culture dishes are used to adjust the number of cells and the time required for the preparation of ASCL cells. Finally, the number of cells is increased, the time of low temperature treatment is prolonged, and the stability of the layer is controlled. The preparation of abdominal artery dissection, preparation, anesthesia management, open surgery, anatomy of artery and iliac artery, and the practice of entry of abdominal artery dissection.