3MC症候群の病態への補体関連因子MASP-1/3の関与とその分子機構の研究

补体相关因子MASP-1/3参与3MC综合征病理及分子机制研究

• 批准号: 26460393
• 负责人: 高橋 実
• 金额: $ 3.16万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26460393/
• 关键词: 補体; MASP; 3MC症候群

3MC症候群は補体関連タンパク質であるMASP-3およびCL-K1がその責任遺伝子として見つかっている。我々は既にMASP1/3を欠損したノックアウトマウス（Masp1/3KO）を世界に先駆けて作成している。Masp1/3KOは胎児期での顎の骨格形成に異常を認めた（論文準備中）。この結果はマウスにおいてもMasp1/3は顎の骨形成に関与することを示し、ヒトの3MC症候群のモデル動物であることを確認できた。そこで我々はMASP-1/-3特にMASP-3がどのように顎の骨形成に関与するのかを分子レベルで詳細に検討するために,まず、MASP-3の組換えタンパク質を作成した。全長MASP-3にタグとしてマウスIgのFcドメインとの融合タンパク質をCHO細胞に発現させて、プロテインAカラムで精製し、純度の高いMASP-3組換えタンパク質を精製することに成功した。プロテインAカラムの素通り画分にほとんどのMASP-3が残存していることがわかり、同様の方法で作成したMASP-1/3の縮合型タンパク質Map44(MAP1)は素通り画分には検出されなかったことから、この現象はMASP-3特異的なものであり、未活性型MASP-3はC末端に存在するセリンプロテアーゼドメイン（SP）がその立体的構造による障壁によって、外部との接触ができないのではと想像できた。そこで、MASP-1/3の競合的阻害作用を示すタンパク質Map44(MAP1)でもMASP-3タンパク質ど同様に標的タンパク質を認識すると仮定し、今後の解析にはMAP44（MAP1）を使用することにした。和光純薬から発売になった新しい発現タグシステム（PAタグ）は従来の6xHis、FLAGなどのタグに比べ、そのモノクローナル抗体のアフィニティーの強さが３オーダー違うシステムを導入し、効率よく組換えタンパク質を純度も高い状態で精製することに成功している。この方法でCL-K1の組換えタンパク質も作成する予定である。

The 3MC syndrome is characterized by MASP-3, CL-K1, and other symptoms. We don't know if the MASP1/3 is good enough to make a difference. (Masp1/3KO) the world is the first to make a difference. During the pregnancy period of Masp1/3KO, the bone lattice is formed (in preparation for this article). The results showed that the bone formation of Masp1/3 syndrome was significantly higher than that of the control group (P < 0.05). MASP-1/-3, MASP-3, bone formation, bone formation and bone formation. The full-length MASP-3 system is sensitive to the Ig Fc system. The integration of the CHO cells shows that the performance is very high, and the accuracy is very high. The performance of the MASP-3 system is very high. In the same way as the method to make a picture of MASP-1/3, Map44 (MAP1), and so on, you can see that the picture is similar to that of the MASP-3 feature. In the inactive type of MASP-3, there are three-dimensional structures in the C-terminal of the inactive type, such as the fabrication of the barrier, the external contact, the imagination, and so on. The hindrance effect of the combination of MASP-1/3 and MAP44 shows that it is necessary to analyze the MAP44 (MAP1) in the future because of the harmful effect of the combination of MAP44 (MAP1) and so on. This is the first time that the 6xHis, FLAG antibodies and antibodies have been detected. The results show that the 6xHis, FLAG, antibodies, antibodies, and the rate of infection are high. The CL-K1 method is used to determine the accuracy of the predetermined data.

项目成果

Essential role for the lectin pathway in collagen antibody-induced arthritis revealed through use of adenovirus programming complement inhibitor MAp44 expression.

• DOI: 10.4049/jimmunol.1400752
• 发表时间: 2014-09-01
• 期刊: Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950)
• 作者: Banda NK;Mehta G;Kjaer TR;Takahashi M;Schaack J;Morrison TE;Thiel S;Arend WP;Holers VM
• 通讯作者: Holers VM

C3 dysregulation due to factor H deficiency is mannan-binding lectin-associated serine proteases (MASP)-1 and MASP-3 independent in vivo.

• DOI: 10.1111/cei.12244
• 发表时间: 2014-04
• 期刊: Clinical and experimental immunology
• 影响因子: 4.6
• 作者: Ruseva MM;Takahashi M;Fujita T;Pickering MC
• 通讯作者: Pickering MC

Comment on "the pro-factor D cleaving activity of MASP-1/-3 is not required for alternative pathway function".

对“替代途径功能不需要 MASP-1/-3 的前因子 D 裂解活性”的评论。

• DOI: 10.4049/jimmunol.1400766
• 发表时间: 2014
• 期刊: J Immunol
• 影响因子: 4.4
• 作者: Takahashi M1;Sekine H2;Fujita T2
• 通讯作者: Fujita T2