カルシトニン受容体の多様性とカルシトニン及び類縁ペプチドの生理作用研究

降钙素受体多样性及降钙素及相关肽的生理作用研究

• 批准号: 08878103
• 负责人: 野沢 龍嗣
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08878103/
• 关键词: ウナギ脳; カルシトニン受容体; エルカトニン; 受容体; ヒト胎盤cDNA; 白血病細胞株; RACE法

生体内のカルシウム濃度維持に関与するホルモンの1つのカルシトニン(CT)は骨粗鬆症の治療薬として使用されている。CTは32のアミノ酸からなるペプチドホルモンで哺乳動物から魚類と広い生物種に分布しているが、人のCTよりも魚類のCTが数十倍効果が高く、治療薬としてはウナギや鮭のCTが専ら用いられている。ウナギCT(エルカトニン)は患者の骨塩量の増加の他に、鎮痛作用も発揮する。今年度はウナギ脳からエルカトニン受容体遺伝子をクローニングして受容体構造を決定し、人の受容体構造と比較して作用の違いを説明すると同時に、鎮痛作用についても考察することを目的として研究した。ウナギCT受容体遺伝子をクローニングするために、既にクローニングされているヒト、ラット、マウスおよびブタCT受容体遺伝子配列から良く保存されている領域を選んでsense primer DNAを、またpoly A領域からantisense primer DNAを設計して、新鮮なウナギ脳から抽出したtotal RNAを鋳型として、RT-PCRを行った。ある組み合わせのprimersを用いた時、予測された大きさのcDNAが増幅された。次に、新鮮ウナギ脳total RNAからmRNAを精製し、cDNAを合成して、cDNAライブラリー(λgtll)を作成した。増幅されたcDNAをprobeとしてウナギCT受容体遺伝子クローンを探索中である。

The maintenance of serum concentrations in vivo is associated with the use of a therapeutic agent for osteoporosis. The CT of fish is tens of times higher than that of human beings. The CT of salmon is more than that of human beings. It is indicated that CT( This year's study is aimed at determining the receptor structure, comparing the receptor structure and its effects, and investigating the analgesic effect. CT receptor gene is selected from among well preserved regions, sense primer DNA is selected from among poly A regions, antisense primer DNA is designed from among regions, total RNA is selected from among regions, and RT-PCR is performed. When the primers of the group were used, the cDNA of the group was amplified. Next, fresh total RNA was purified, cDNA was synthesized, cDNA was prepared. The cDNA probe was used to detect the expression of Ct receptor gene.