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新たに見出した1価陽イオンポンプ触媒鎖N末端の多重リン酸化の意義解明の糸口

新发现的线索阐明单价阳离子泵催化链 N 端多重磷酸化的重要性

基本信息

批准号：
09878131
负责人：
谷口和弥
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

H/K-ATPaseの末端の多重リン酸化に関して,関与するTyr-KinaseとSer-Kinaseを免疫化学的手法で同定することに成功し又Tyr-phosphataseに関して新たな酵素で有る可能性が示唆された。さらに従来のin vitroで検出されていた、可逆的リン酸化が胃壁細胞で生じていることが明かにされた。多重リン酸化とP-typeATPasesのoligomer構造との関係を明かにするため膜Na/K-ATPase及びH/K-ATPaseの機能的単位が_-protomerを単位とするoligomer構造からなることを直接証明するための研究をおこなった。その結果、触媒鎖あたりのRbの結合はRb閉塞酵素、Mg,Naと低濃度ATPに依存するRb閉塞、Mg,Naと高濃度ATP存在下でのRb閉塞でそれぞれ2:1:0.5となった。ATPの最大結合量は高濃度のEDTA存在下で触媒鎖あたり0.75、ATPase反応中には、0.25に低下した。さらに興味深いことはATPase反応中の1/2の触媒鎖がリン酸化中間体を形成しているさい、1/4の触媒鎖にはATPが、他の1/4の触媒鎖にはADPとPiのいずれも酸に不安定な形で結合していることがはじめて明かにされたことである。これらの結果は、Na/K-ATPaseが4量体構造をとり、P-type ATPaseに共通の反応中間体EPと同時に筋収縮に関与するMyosin,ATPaseと類似の反応中間体E-ADP-Piを形成することを初めて示したものである。

The end of H/K-ATPase has multiple acidified enzymes, which is consistent with the immunochemical technique of "Tyr-Kinase" Ser-Kinase. "successful" and "Tyr-phosphatase" new enzymes have "possibility" to indicate "instigation". In the in vitro, the cells of the stomach wall are reversibly acidified, and the cells of the stomach wall are affected. Multi-acidified P-typeATPases oligomer to make clear that the position of the membrane Na/K-ATPase and the energy of the H/K-ATPase machine, the position of the membrane, the position of the protomer, the position of the oligomer, the temperature, the position, the position, the The results of the experiment, the combination of Rb Rb with Rb enzyme, the dependence of Mg,Na with low concentration of Rb, and the presence of Mg,Na with high concentration of ATP, the effect of Rb plug is different from that of 1RV 0.5%. The maximum binding amount of ATP was 0.75 in the presence of high degree of EDTA, 0.75 in the presence of ATPase, and 0.25 in low concentration. There is a deep smell in the ATPase reaction. In the process of acidizing, the body is formed in the acidizing process, while the ATP is formed in the acidizing process. In the case of ADP, Pi, acid, acid and acid. The results of the test results, the Na/K-ATPase 4 mass measurement system, the P-type ATPase common anti-EP test and the anti-Myosin,ATPase test are similar to those of the target E-ADP-Pi in the same time.