"シトルリン-NOサイクル"は存在するか?

“瓜氨酸-NO 循环”是否存在？

• 批准号: 08877035
• 负责人: 森 正敬
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877035/
• 关键词: 一酸化窒素; マクロファージ; 一酸化窒素合成酵素; アルギナーゼII; アルギナーゼI; リポポリサッカライド

齧歯類のマクロファージでは免疫刺激により誘導型一酸化窒素合成酵素(iNOS)が発現し多量の一酸化窒素(NO)が産生される。NOは殺菌作用を持ち生体防御に働くと考えられるが、一方で宿主細胞にも傷害を与え宿主個体にとっても血圧低下など有害に働く可能性がある。従って、過剰なNO産生を抑制する何らかの機構の存在が考えられる。NOはNOSによってアルギニンから生成されるが、アルギニンはアルギナーゼの基質でもあるため、アルギナーゼがNOSと同一の細胞に発現すると基質を競合し、NO産生を抑制するものと推測される。我々はアルギナーゼによるNO合成調節の可能性をラット腹腔内マクロファージを用いて検討した。8週令ラットにポリペプトンを投与し、腹空内マクロファージを採取した。初代培養細胞にリポポリサッカライド(LPS)を添加し、RNAブロット法によりiNOSと肝型アルギナーゼ(アルギナーゼI)に発現を解析したところ、LPS濃度依存的にiNOSおよびアルギナーゼ発現の誘導が観察された。また、LPS投与ラットの肺においてもin vivoでiNOSとアルギナーゼIの共誘導が認められた。現在、LPS刺激マクロファージにおけるアルギナーゼI誘導の機構と役割を解析中である。一方、既にクローニングされている肝型アルギナーゼの他に、腎臓などにアルギナーゼアイソザイムがあることが以前より知られていた。そこでアルギナーゼによるNO合成調節の解明を目的として、非肝型アルギナーゼ(アルギナーゼII)のクローニングを試みた。ヒト肝癌細胞株HepG2より非肝型アルギナーゼと思われる約280bpのcDNA断片を得た。この領域において約60%のホモロジーを示した。これをプローブとしたRNAブロット解析により腎臓に高い発現を認めたが肝臓にはほとんど発現を認めなかった。また、マウスマクロファージ細胞株Rawにおいて、LPS投与によりiNOSと本遺伝子の共誘導を認めた。

In response to immune stimulation, the rodent's immune system produces a large amount of nitric oxide synthase (NO). NO plays a vital role in maintaining the organism's defense. The existence of a mechanism to suppress NO production is examined. NO is produced in the same cell, and NO production is inhibited. We have explored the possibility of regulating NO synthesis in the future by using a real-time intra-abdominal microphone. 8 weeks ago In primary culture cells, LPS was added, RNA was used to analyze iNOS and hepatic type iNOS expression. LPS concentration-dependent iNOS expression was observed. In vivo, iNOS and LPS were co-induced by the two drugs. Now, LPS stimulation is the most important factor In addition to the above, it is also possible to use the following methods to solve the problem: The purpose of NO synthesis regulation is to clarify the relationship between NO synthesis and NO synthesis, and to clarify the relationship between NO synthesis and NO synthesis. HepG2 is a non-hepatic cell line and a cDNA fragment of about 280bp was obtained. About 60% of the field is covered. This is the first time that I've seen this. Cell line Raw, LPS and iNOS co-induction

项目成果

Sonoki,T.,et al.: "Coinduction of nitric oxide synthase and arginase I in cultured rat peritoneal macrophages and rat tissues in vivo by lipopolysaccharide." J.Biol.Chem.(in press).

Sonoki,T.,et al.：“脂多糖在培养的大鼠腹膜巨噬细胞和大鼠体内组织中共同诱导一氧化氮合酶和精氨酸酶 I”。

Nagasaki,A.,et al.: "Coinduction of nitric oxide synthase,argininosuccinate synthetase and argininosuccinate lyase in lipopolysaccharide-treated rats." J.Biol.Chem.271. 2658-2662 (1996)

Nagasaki,A.,et al.：“脂多糖处理的大鼠中一氧化氮合酶、精氨基琥珀酸合成酶和精氨基琥珀酸裂合酶的共同诱导。”

Gotoh,T.,et al.: "Molccular cloning of cDNA for nonhepatic mitochondrial arginase (arginase II) and comparison of its induction with nitric oxide synthase in a murine macrophatge-like cell line" FEBS Lett.395. 119-122 (1996)

Gotoh,T.,et al.：“非肝线粒体精氨酸酶（精氨酸酶 II）的 cDNA 分子克隆及其与鼠类巨噬细胞样细胞系中一氧化氮合酶的诱导比较”FEBS Lett.395。

長崎明利,他: "シトルリン-NOサイクル-NO合成における役割-" 細胞工学. 15・10. 1402-1408 (1996)

Akitoshi Nagasaki 等：“瓜氨酸-NO 循环-NO 合成中的作用-”细胞工程15・108（1996）。

Gotoh,T.,et al.: "The glucocoid-responsive gene cascade : Activation of the rat arginase gene through induction of c/EBPβ." J.Biol.Chem.(in press).

Gotoh, T. 等人：“糖类反应基因级联：通过诱导 c/EBPβ 激活大鼠精氨酸酶基因。”（J.Biol.Chem）。