课题基金 / 基金详情

タンパク質のミトコンドリア移行:単一細胞レベルでのリアルタイム解析

タンパク質のミトコンドリア移行:単一細胞レベルでのリアルタイム解析
蛋白质的线粒体易位：单细胞水平的实时分析
批准号：
09877027
负责人：
森 正敬
金额：
$1.28万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1997 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877027/
关键词：
ミトコンドリア蛍光タンパク質GFP細胞内輸送オルニチントランスカルバミラーゼ

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项目成果

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ミトコンドリアタンパク質の大部分はサイトソルより輸送されるが、それらの多くはN末端側にプレ配列を持つ前駆体として合成される。輸送されたタンパク質はミトコンドリアのマトリックスに存在するプロテアーゼによるプロセシングを受け、成熟タンパク質となる。今回我々は、ミトコンドリアへのタンパク質移行のメカニズムを単一細胞レベルで解析するために、Aequorea victoria由来のgreen fluorescent protein(GFP)のN末端側にヒト・オルチニントランスカルバミラーゼ(OTC)のプレ配列を持つ融合タンパク質(pOTC-GFP)を発現するプラスミドを構築した。これをCOS-7培養細胞内へ導入し、蛍光顕微鏡による観察を行ったところ、ミトコンドリアの形態と同様な糸状の蛍光が観察された。また、移行したpOTC-GFPは本来のGFPと同じ分子量であることから、pOTC-GFPは移行の際にプロセシングを受けていることが示された。脱共役剤存在下では移行効率の著しい低下が観察された。さらに、マイクロインジェクション法を用いて、このプラスミドを培養細胞の核内に直接導入することにより、導入後約3時間でミトコンドリア様の蛍光が観察された。この系はタンパク質のミトコンドリアへの移行過程を単一細胞内でリアルタイムに観察するのに有用な系であると期待される。
期刊论文(2)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
矢野正人, 森正敬: "GFPを用いたタンパク質の細胞内輸送の解析" 生体の科学. 49・1. 61-67 (1998)
矢野正人、森正孝：“利用 GFP 进行细胞内蛋白质转运分析”《生物科学》49・1（1998 年）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Yano, M.et al.: "Visualization of mitochondrial protein import in cultured mammalian cells with green fluorescent protein and effects of overexpression of the human the import receptor Tom20" Jouranl of Biological Chemistry. 272・13. 8459-8465 (1997)
Yano，M.等人：“用绿色荧光蛋白观察培养的哺乳动物细胞中的线粒体蛋白输入以及人输入受体Tom20的过度表达的影响”《生物化学杂志》272·13（1997）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
糖尿病誘発剤でCHOP破壊マウスに生じた巨大脾腫の解析
  • 批准号：
    16659087
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.24万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    森 正敬
  • 依托单位：
    Kumamoto University
CHOP遺伝子破壊によりストレプトゾトシン糖尿病モデルで生じた巨大脾腫の謎
  • 批准号：
    15659081
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $1.28万
  • 财政年份：
    2003
  • 负责人：
    森 正敬
  • 依托单位：
    Kumamoto University
中枢神経系でのアルギニン代謝酵素によるNO産生とアポトーシスの制御
  • 批准号：
    12877028
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $1.28万
  • 财政年份：
    2000
  • 负责人：
    森 正敬
  • 依托单位：
    Kumamoto University
中枢神経系でのアルギニン代謝酵素によるNO産生の制御
  • 批准号：
    11877029
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $0.0万
  • 财政年份：
    1999
  • 负责人：
    森 正敬
  • 依托单位：
    Kumamoto University
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