植物病原糸状菌におけるトランスポゾンタギング

植物病原真菌中的转座子标记

• 批准号: 09876013
• 负责人: 柘植 尚志
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09876013/
• 关键词: 植物病原糸状菌; Fusarium oxysporum; トランスポゾン; トランスポゾンタギング

トランスポゾンは、各種生物における遺伝子単離の強力なツールとして利用されている。いわゆるトランスポゾンタギングである。申請者らは、ユウガオつる割病菌(Fusarium oxysporum f.sp.lagenariae)から、これまで病原糸状菌では全く報告されていなかったAcタイプトランスポゾン様配列(Tfolと命名)を単離した。本研究では、Tfol配列を用いた糸状菌の遺伝子タギング法の確立を目指し、以下の研究を行った。1.Fusarium oxysporumの各種分化型におけるTfo1様配列の分布F.oxysporumの各種分化型におけるTfo1様配列の分布をサザンハイブリダイゼーションとPCR法を用いて調査した。その結果、ユウガオつる割病菌だけでなく、用いた10分化型のすべての菌株からTfo1様配列が検出され、本配列がF.oxysporumに広く分布していることが明らかとなった。2.Tfo1からの転写RNAの検出Tfo1にはトランスポゼ-ス様タンパク質の読み枠(ORF1)が存在する。ユウガオつる割病菌とトマト根腐萎ちょう病菌(f.sp.radicis-lycopersici)について、ノーザンハイブリダイゼーションとRT-PCR法を用いてORF1の転写RNAの検出を試みた。その結果、どちらの分化型からも転写RNAが検出され、ORF1がトランスポゼ-ス遺伝子として機能していることが示された。以上の結果は、Tfo1がトランスポゾン活性を有すること、さらに糸状菌のトランスポゾンタギングに利用できることを強く示唆した。そこで現在、Tfo1配列を組み込んだ形質転換ベクターを各種糸状菌に導入し、遺伝子タギングを試みている。

All kinds of biological agents can be used in different ways.いわゆるトランスポゾンタギングである。The applicant shall submit a complete report on the pathogen (Fusarium oxysporum f. sp. lagenariae), and the applicant shall submit a complete report on the pathogen (Fusarium oxysporum f. sp. lagenariae). This study is aimed at establishing a method for the identification of Tfol-like genes in the genome. The following studies are conducted. 1. The distribution of Tfo1 in Fusarium oxysporum was investigated by PCR. As a result, F.oxysporum was isolated from 10 different strains of E. oxysporum, and the distribution of F.oxysporum was detected in the same sequence. 2. Tfo1 is a non-coding RNA and Tfo1 is a non-coding RNA. The detection of RNA from ORF1 by RT-PCR was studied. As a result, ORF1 is the most important gene in the gene family. The above results show that Tfo1 can be used as an indicator of the activity of bacteria. In addition, Tfo1 is a new type of bacteria, which can be introduced into a variety of bacteria.

项目成果

Kusaba,M.: "Mitochondrial DNA variation in host-specific toxin-producing pathogens in the genus Alternaria" Annals of the Phytopathological Society of Japan. 63(6). 463-469 (1997)

Kusaba,M.：“链格孢属宿主特异性产毒病原体的线粒体 DNA 变异”，日本植物病理学会年鉴。

Kaneko,I.: "Structural analysis of the plasmid pAAT56 of the filamentous fugus Alternaria alternata" Gene. 203(1). 51-57 (1997)

Kaneko,I.：“丝状河豚 Alternaria alternata 的质粒 pAAT56 的结构分析”基因。

Katsuya,S.: "Circular DNA plasmid in the phytopathogenic fungus Alternaria alternata:temperature-dependent curing and association with pathogenicity" Genetics. 146(1). 111-120 (1997)

Katsuya,S.：“植物病原真菌链格孢菌中的环状 DNA 质粒：温度依赖性固化及其与致病性的关联”遗传学。