植物病原糸状菌におけるトランスポゾンタギング

植物病原真菌中的转座子标记

• 批准号: 09876013
• 负责人: 柘植 尚志
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09876013/
• 关键词: 植物病原糸状菌; Fusarium oxysporum; トランスポゾン; トランスポゾンタギング

トランスポゾンは、各種生物における遺伝子単離の強力なツールとして利用されている。いわゆるトランスポゾンタギングである。申請者らは、ユウガオつる割病菌(Fusarium oxysporum f.sp.lagenariae)から、これまで病原糸状菌では全く報告されていなかったAcタイプトランスポゾン様配列(Tfolと命名)を単離した。本研究では、Tfol配列を用いた糸状菌の遺伝子タギング法の確立を目指し、以下の研究を行った。1.Fusarium oxysporumの各種分化型におけるTfo1様配列の分布F.oxysporumの各種分化型におけるTfo1様配列の分布をサザンハイブリダイゼーションとPCR法を用いて調査した。その結果、ユウガオつる割病菌だけでなく、用いた10分化型のすべての菌株からTfo1様配列が検出され、本配列がF.oxysporumに広く分布していることが明らかとなった。2.Tfo1からの転写RNAの検出Tfo1にはトランスポゼ-ス様タンパク質の読み枠(ORF1)が存在する。ユウガオつる割病菌とトマト根腐萎ちょう病菌(f.sp.radicis-lycopersici)について、ノーザンハイブリダイゼーションとRT-PCR法を用いてORF1の転写RNAの検出を試みた。その結果、どちらの分化型からも転写RNAが検出され、ORF1がトランスポゼ-ス遺伝子として機能していることが示された。以上の結果は、Tfo1がトランスポゾン活性を有すること、さらに糸状菌のトランスポゾンタギングに利用できることを強く示唆した。そこで現在、Tfo1配列を組み込んだ形質転換ベクターを各種糸状菌に導入し、遺伝子タギングを試みている。

转座子被用作各种生物中基因隔离的强大工具。这就是所谓的转座标记。申请人分离了氧气孢子菌的AC型转座子样序列（命名为TFOL）。 sp。 Lagenariae，以前尚未在致病真菌中报道。在这项研究中，我们进行了以下研究，目的是建立使用TFOL序列的丝状真菌的遗传标记方法。 1。使用南部杂交和PCR研究了各种分化形式的TFO1样形式的TFO1样序列在各种分化形式的F. oxysporum中分布TFO1样序列的分布。结果，不仅在10个分化菌株中，而且在所有10种区分菌株中都检测到TFO1样序列，这表明该序列在F. oxysporum中广泛分布。 2。从TFO1 TFO1检测转录RNA的读数框（ORF1）用于转座酶样蛋白。我们试图使用北部杂交和RT-PCR检测ORF1转录RNA（F.Sp. Radicis-Lycopersici）的ORF1转录RNA。结果表明，在两种分化形式中检测到转录RNA，表明ORF1作为转座酶基因的作用。以上结果强烈表明TFO1具有转座子活性，可用于丝状真菌的转座子标记。因此，我们目前正在引入将TFO1序列纳入各种丝状真菌并试图对基因进行标记的转换矢量。

项目成果

Kusaba,M.: "Mitochondrial DNA variation in host-specific toxin-producing pathogens in the genus Alternaria" Annals of the Phytopathological Society of Japan. 63(6). 463-469 (1997)

Kusaba,M.：“链格孢属宿主特异性产毒病原体的线粒体 DNA 变异”，日本植物病理学会年鉴。

Kaneko,I.: "Structural analysis of the plasmid pAAT56 of the filamentous fugus Alternaria alternata" Gene. 203(1). 51-57 (1997)

Kaneko,I.：“丝状河豚 Alternaria alternata 的质粒 pAAT56 的结构分析”基因。

Katsuya,S.: "Circular DNA plasmid in the phytopathogenic fungus Alternaria alternata:temperature-dependent curing and association with pathogenicity" Genetics. 146(1). 111-120 (1997)

Katsuya,S.：“植物病原真菌链格孢菌中的环状 DNA 质粒：温度依赖性固化及其与致病性的关联”遗传学。