イチゴ黒斑病菌の病原性を決定するCD染色体の機能マッピング

决定草莓黑斑菌致病性的CD染色体功能图谱

• 批准号: 18658018
• 负责人: 柘植 尚志
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18658018/
• 关键词: 植物病原糸状菌; Alternaria alternata; 宿主特異的毒素; イチゴ黒斑病菌; CD染色体; 遺伝子発現解析; プロトプラスト融合

先に、イチゴ黒斑病菌のAF毒素生合成遺伝子クラスターが培地上での成育には必要でない1.05Mbのconditionally dispensable染色体(CD染色体)にコードされていることを見出した。そこで、本染色体の塩基配列を決定し、449kbと554kbの2つのコンティグ(コンティグ1および2)を同定した。さらに、コンティグ1と2にコードされる151個および170個の遺伝子を推定し、コンティグ2から毒素生合成遺伝子クラスターを同定した。本研究では、両コンティグにコードされるすべての遺伝子について、栄養条件が異なる5種の培地で培養した場合の転写レベルをリアルタイムRT-PCR法によって定量解析した。その結果、ほとんどの遺伝子の転写レベルがアクチン遺伝子(内部標準)に比べ著しく低いことが明らかとなった。また、ほとんどの遺伝子の発現が、植物中と類似した条件であるN源を含まない最少培地で誘導されること、他の培地での遺伝子発現パターンが両コンティグ間で異なることを見出した。CD染色体の毒素生合成遺伝子領域以外について、40kb程度を順次欠失させた部分欠失変異株シリーズを作成し、新奇な病原性関連遺伝子の同定を試みた。研究を進める過程で、CD染色体にコードされる遺伝子の一部が他の染色体にも存在することが明らかとなった。そこで、上記変異株を作出するための材料として、CD染色体遺伝子をほとんど持たない非病原性株にCD染色体を導入した菌株の作出を試みた。非病原性株にハイグロマイシンB抵抗性遺伝子、イチゴ黒斑病菌にジェネティシン抵抗性遺伝子をそれぞれ導入した。なお、イチゴ黒斑病菌では、相同的組換えを用いてジェネティシン抵抗性遺伝子をCD染色体に導入した。両菌株のプロトプラスト融合によって、両薬剤に抵抗性の融合株を選抜し、融合株の毒素生産性、病原性、核型などを解析した。

First, the pathogen of black spot pathogen, AF toxin, was synthesized. It was necessary to breed on the ground. It was necessary to 1.05Mb the conditionally dispensable chromosome (CD chromosome). This chromosome is arranged on the basis of determination, 449kb, 554kb, 554 kb2, 449 kb, 554 kb2, 554 kb, 554 kb, 554 k In the first two years of the experiment, 151 and 170 were presumed to be presumptive, and the synthetic toxins were produced. In this study, we used the RT-PCR method to analyze the quantitative analysis in this study. The results show that the results are better than those of the internal standard, and the results are better than those of the internal standard. The information in the plant is similar to that in the plant, and the source is similar to the condition in the plant. The source contains the information that you should at least be able to help you. The CD chromosomal toxins were produced outside the field of synthesis, and some of the plants were partially deficient in the degree of 40kb, and the pathogenicity of the virus was similar to that of the test. The purpose of this study is to study the progress of the process, CD chromosome analysis, and the existence of other chromosomal information. The samples were collected and recorded. The materials were collected and the CD chromosomes were cloned. The CD chromosomes of the non-pathogenic strains were transferred into the strains to make an attempt. The non-pathogenic strain was infected with B-resistance, black spot pathogen, black spot pathogen, black spot pathogen. The CD chromosomes were cloned into the cells of the same tissue, which were infected by the pathogen of black spot and the same tissue. Strain

项目成果

DNA transposon fossils present on the conditionally dispensable chromosome controlling AF-toxin biosynthesis and pathogenicity of Alternaria alternata

存在于有条件可有可无的染色体上的 DNA 转座子化石控制着链格孢 (Alternaria alternata) 的 AF 毒素生物合成和致病性

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of General Plant Pathology 72・4
• 作者: 水口裕也;他;細川宗孝・鈴江久尚・矢澤進;B. Kim;H. Shimura;A. Nagamatsu;T. Uehara;J. S. Hong;K. Goto;A. Nagamatsu;増田 税;増田 税;太田垣駿吾;永松 敦;Rieko Hatta
• 通讯作者: Rieko Hatta