Visualisierung von Mechanismen der Geninaktivierung während der X-Chromosominaktivierung in der Maus

小鼠 X 染色体失活过程中基因失活机制的可视化

• 批准号: 72864899
• 负责人: Dr. Dagmar Pommereit
• 金额: --
• 依托单位: Department of Molecular Biology
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2007-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/72864899?language=en
• 关键词: Visualisierung; von; Mechanismen; der; Geninaktivierung

Die X-Chromosominaktivierung (XCI) in weiblichen embryonalen Stammzellen (ES-Zellen) ist in der Vergangenheit mit biochemischen und/oder zytogenetischen Methoden an fixierten Proben studiert worden. Diese Techniken sind jedoch unzureichend, um einen dynamischen Einblick in Prozesse während der XCI zu erlauben. Um eine dynamische Sicht auf die XCI zu vermitteln, wird das beantragte Projekt Lebendzell- und Förster Resonanz Energie Transfer (FRET)-Mikroskopie auf die Erforschung zweier Schlüsselereignisse der randomisierten Form der XCI von lebenden weiblichen ES-Zellen anwenden: der X-X-Paarung und der nukleolären Assoziation des inaktiven X (Xi). Zu Beginn der XCI findet eine transiente Paarung der X-Inaktivierungszentren (Xics) der Xs in der nukleären Peripherie von weiblichen ES-Zellen statt. Diese Interaktion ist obligatorisch für die XCI. Ein Ausfall der X-X-Paarung verhindert die XCI. Nach der XCIInitiierung migriert das Xi in einen perinukleolären Bereich in einer Xist-abhängigen Weise in der S-Phase, vermutlich um seinen inaktiven Zustand aufrechtzuerhalten. Das beantragte Projekt wird die Zeitverläufe und Lokalisierungen dieser Ereignisse in lebenden weiblichen ES-Zellen in Echtzeit studieren. Die Lebendzell-Mikroskopie von fluoreszent markierter Xist RNA wird sie in eine zeitliche Ordnung mit der Hochregulation von Xist bringen. Weiterhin wird die FRET-Mikroskopie dazu verwendet werden, um in Bezug auf andere Ereignisse der XCI zu studieren, ob und wann die Xics miteinander interagieren.

胚胎干细胞（ES-Zellen）的X染色体异常（XCI）是用生物化学和生物遗传学方法进行的一项固定的沃登研究。这种技术是一种新的技术，一种动态的Einblick在XCI的过程中被开发出来。在XCI的动力学研究中，我们将设计Lebendzell- und Förster Resonanz Energie Transfer（FRET）-Mikroskopie方案，用于研究由ES-Zellen设计的XCI的随机形式：X-X-Paarung und der nukleolären Assoziation des inaktiven X（Xi）。Zu Beginn der XCI findet eine transiente Paarung der X-Inaktivierungszentren（Xics）der Xs in der nukleären Peripherie von weiblichen ES-Zellen statt.这种互动是XCI的义务。一个X-X-Paarung的秋天阻止了XCI。在XCI计划将Xi迁移到S阶段的一个新的边界后，它将使自己的不活跃的Zustand更加活跃。这一伟大的项目将使Ereignisse在Echtzeit studieren的生活中受益。荧光标记Xist RNA的Lebendzell-Mikroskopie将在一个时代秩序中与Xist的Hochregulation一起出现。之后，FRET-Mikroskopie将被韦尔登，在XCI的研究和学习中获得Ereignisse，并希望XCI能够相互合作。