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遺伝子タギング法によるウイルス病抵抗性遺伝子と抵抗性発現調節遺伝子の単離と解析

利用基因标签方法分离和分析病毒病抗性基因和抗性表达调控基因

基本信息

批准号：
08760042
负责人：
高橋英樹
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

キュウリモザイクウイルス系統(CMV-Y)をアラビドプシスecotype C24に接種すると過敏感反応を、ecotype Col.に接種すると全身感染を示す。これまでの研究よりこの過敏感反応は、C24の有する単一優性遺伝子(RCY1)とCMV-YのRNA3に存在する非病原性遺伝子との組合せにより誘導されることが明らかになっている。本研究では、遺伝子タギング法によりRCY1を単離するために、RCY1の遺伝子マッピングとC24へのトランスポゾンの導入を行った。(1)これまでに遺伝子地図上にマップされている遺伝的マーカーとSSLPマーカーを用いてArabidopsis thaliana C24染色体上におけるRCY1遺伝子の位置を解析したところ、第5染色体のマーカーnga139とnga106の間に存在することが明らかになった。(2)C24を、トウモロコシのトランスポゾンAcを導入したアラビドプシス【.right filled triangle.】Nae IsAc(Gus)-1(Arabidopsis Biological Resource Center,Ohio,U.S.A.)と交配し、transposase遺伝子をC24に導入した。(3)C24をトウモロコシのトランスポゾンDsを導入したアラビドプシスHmR Ds-A3(Arabidopsis Biological Resource Center,Ohio,U.S.A)と交配し、DsエレメントをC24に導入した。(4)交配により得られた両植物をかけ合わせ種子を得た。この種子細胞にはAcとDsが共存するため、Dsに転移が誘導される。これからは、得られた約10,000種子について、CMV-Yに対する反応を調べ、RCY1遺伝子がDsの挿入を受けて不活性化されCMV-Yが全身感染するようになった個体(RCY1がトランスポゾンタギングされた個体)を選抜する予定である。

The CMV-Y system is used to detect the presence of ecotype C24 and to detect systemic infection. This study was conducted to investigate the combination of nonpathogenic genes present in the presence of RCY1 and CMV-Y and RNA3 in the presence of hypersensitive genes, C24 and C24. In this study, the introduction of RCY1 and RCY1 gene fragments into C24 gene fragments was studied. (1)The position of RCY1 gene on chromosome C24 of Arabidopsis thaliana was analyzed. The position of RCY1 gene on chromosome 5 was analyzed. (2)C24 Nae IsAc(Gus)-1(Arabidopsis Biological Resource Center,Ohio,U.S.A.) Mating, transposase, C24, introduction. (3)C24 is introduced into HmR Ds-A3(Arabidopsis Biological Resource Center,Ohio, U.S.A.). (4)The seed is harvested. These seed cells are induced to co-exist and co-exist. The results were approximately 10,000 seed samples, CMV-Y responses, RCY1 responses, and RCY1 responses.