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遺伝子タギング法によるウイルス病抵抗性遺伝子と抵抗性発現調節遺伝子の単離と解析

利用基因标签方法分离和分析病毒病抗性基因和抗性表达调控基因

基本信息

批准号：
08760042
负责人：
高橋英樹
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

キュウリモザイクウイルス系統(CMV-Y)をアラビドプシスecotype C24に接種すると過敏感反応を、ecotype Col.に接種すると全身感染を示す。これまでの研究よりこの過敏感反応は、C24の有する単一優性遺伝子(RCY1)とCMV-YのRNA3に存在する非病原性遺伝子との組合せにより誘導されることが明らかになっている。本研究では、遺伝子タギング法によりRCY1を単離するために、RCY1の遺伝子マッピングとC24へのトランスポゾンの導入を行った。(1)これまでに遺伝子地図上にマップされている遺伝的マーカーとSSLPマーカーを用いてArabidopsis thaliana C24染色体上におけるRCY1遺伝子の位置を解析したところ、第5染色体のマーカーnga139とnga106の間に存在することが明らかになった。(2)C24を、トウモロコシのトランスポゾンAcを導入したアラビドプシス【.right filled triangle.】Nae IsAc(Gus)-1(Arabidopsis Biological Resource Center,Ohio,U.S.A.)と交配し、transposase遺伝子をC24に導入した。(3)C24をトウモロコシのトランスポゾンDsを導入したアラビドプシスHmR Ds-A3(Arabidopsis Biological Resource Center,Ohio,U.S.A)と交配し、DsエレメントをC24に導入した。(4)交配により得られた両植物をかけ合わせ種子を得た。この種子細胞にはAcとDsが共存するため、Dsに転移が誘導される。これからは、得られた約10,000種子について、CMV-Yに対する反応を調べ、RCY1遺伝子がDsの挿入を受けて不活性化されCMV-Yが全身感染するようになった個体(RCY1がトランスポゾンタギングされた個体)を選抜する予定である。

キュウリザイクウイルス system(CMV-Y)をアラビドプシスecotype C24にvaccinationするとhypersensitive reaction を, ecotype Col. Inoculation does not show systemic infection.これまでの Research よりこの Hypersensitive Reaction は, C24 の有する単一优性伝子(RCY1)とCMV- The existence of YのRNA3 is a combination of non-pathogenic genes and a combination of YのRNA3 and induction of Yされることが明らかになっている. This research is based on the original method of the research: RCY1, RC Y1の缝子マッピングとC24へのトランスポゾンの Import を行った. (1)これまでに伝子地図上にマップされている伝的マーカーとSSLPマーカーを用いてArabidopsis thaliana Analysis of the location of the RCY1 residue on chromosome C24, chromosome 5のマーカーnga139とnga106の间にexistent することが明らかになった. (2)C24を、トウモロコシのトランスポゾンAcを Importedしたアラビドプシス【.right filled triangle.】Nae IsAc(Gus)-1(Arabidopsis Biological Resource Center, Ohio, U.S.A.) and transposase is imported into C24. (3)C24をトウモロコシのトランスポゾンDsを ImportedしたアラビドプシスHmR Ds-A3 (Arabidopsis Biological Resource Center,Ohio,U.S.A)とMATINGし、DSエレメントをC24にImportした. (4) Mating and mating can produce seeds.このseed cells にはAc とDs が coexist するため, DS に転movable が inducing される.これからは, 得られたabout 10,000 seeds について, CMV-Y に対するcounter-応を Adjustment べ, RCY1 伝子がDsのinsert をReceived けて is not alive Sexualized CMV-Y Systemic Infection Individual (RCY1がトランスポゾンタギングされた Individual)を选抜する Predetermined である.