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神経伝達物質放出機構の分子カスケード

神经递质释放机制的分子级联

基本信息

批准号：
08680836
负责人：
阿部輝雄
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680836/
关键词：
伝達物質放出シナ-フィンシナプス小胞

项目摘要

伝達物質放出に直接関与すると考えられる蛋白質複合体成分間の相互作用、ならびに複合体構成成分のうち私達が最初に報告したシナ-フィンの機能を追究するため、複合体成分間の相互作用の解析、ラット脳における二つのisoformシナ-フィン1、2のmRNAの発現部位の同定等の実験を行い、以下のような結果を得た。(1)ラット脳膜分画のTriton X-100抽出物をグリセロール密度勾配遠心にかけ、蛋白質複合体成分に対する抗体による免疫沈降後、イムノブロットによって沈降物を同定した。その結果、シナプトダクミン、シンタキシン、SNAP-25、VAMP、シナ-フィンはほとんどが7Sの粒子として存在すること、このほかにVAMPおよびシナ-フィンを含まない複合体が存在することなどが明らかになった。この様な複合体の不均一性は複合体の形成、解消過程にいくつかの中間段階があることを示唆しており、その動態がいかにして制御されるかが今後解明すべき重要な課題である。(2)組み換シナ-フィンは内在性のシナ-フィンを置換してシンタキシン等を含む7S粒子を形成できる。この複合体の性質を検討中である。(2)シナ-フィン1、2に対するmRNAは脳にほとんど限られており、精巣等にわずかに発現している。また、両者の脳内分布は小脳、視床、嗅球、大脳皮質等において有意に異なる。したがって両蛋白質は異なった生理的意味を有するものと予想される。現在、isoformのそれぞれに特異的な単クローン抗体を用いて免疫組織化学により両isoformの分布を調べている。

The release of dentic substances is directly related to the interaction between the components of the protein complex and the interaction between the components of the protein complex.にComplex component のうち自达がInitial report したシナ-フィンのfunctional をinvestigation するため、 Analysis of interactions between complex components, ラット脳における二つのisoformシナ-フィン1 and 2 are the same as the present parts of the mRNA, and the following results are obtained. (1) Triton with ラット脳 film separation X-100 extract をグリセロールdensity blends telecentric にかけ, protein complex ingredients に対するAntibody によるAfter immunoprecipitation, イムノブロットによって sedimentation を Same determinationした.そのRESULT, シナプトダクミン, シンタキシン, SNAP-25, VAMP, シナ-フィンはほとんどが7Sのparticleとしてexistent すること、このほかにVAMPおよびシナ-フィThe existence of the することなどが明らかになった. The inhomogeneity of the complex and the process of formation and dissolution of the complex Instruction and control of dynamic and dynamic control will be explained in the future and important issues will be explained. (2) The internal nature of the set of みシナ-フィンは intrinsic のシナ-フィンをsubstitution してシンタキシン and other をcontaining 7S particles is formed by できる. The nature of the このcomplex is である. (2) シナ-フィン1, 2 に対するmRNA は脳にほとんど limit られており, 精巣wait にわずかに発开している. The distribution within the body of the skin is the small breast, optic bed, olfactory bulb, large skin cortex, etc. There is no intentional difference between them.したがって両Protein はdifferent なったphysiological meaning を有するものと yu think される. Now, the isoform-specific Nucleotide antibody is used for immunohistochemistry and the distribution of isoform-specific antibodies.