神経伝達物質放出機構の分子カスケード

神经递质释放机制的分子级联

基本信息

批准号：
08680836
负责人：
阿部輝雄
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680836/
关键词：
伝達物質放出シナ-フィンシナプス小胞

项目摘要

伝達物質放出に直接関与すると考えられる蛋白質複合体成分間の相互作用、ならびに複合体構成成分のうち私達が最初に報告したシナ-フィンの機能を追究するため、複合体成分間の相互作用の解析、ラット脳における二つのisoformシナ-フィン1、2のmRNAの発現部位の同定等の実験を行い、以下のような結果を得た。(1)ラット脳膜分画のTriton X-100抽出物をグリセロール密度勾配遠心にかけ、蛋白質複合体成分に対する抗体による免疫沈降後、イムノブロットによって沈降物を同定した。その結果、シナプトダクミン、シンタキシン、SNAP-25、VAMP、シナ-フィンはほとんどが7Sの粒子として存在すること、このほかにVAMPおよびシナ-フィンを含まない複合体が存在することなどが明らかになった。この様な複合体の不均一性は複合体の形成、解消過程にいくつかの中間段階があることを示唆しており、その動態がいかにして制御されるかが今後解明すべき重要な課題である。(2)組み換シナ-フィンは内在性のシナ-フィンを置換してシンタキシン等を含む7S粒子を形成できる。この複合体の性質を検討中である。(2)シナ-フィン1、2に対するmRNAは脳にほとんど限られており、精巣等にわずかに発現している。また、両者の脳内分布は小脳、視床、嗅球、大脳皮質等において有意に異なる。したがって両蛋白質は異なった生理的意味を有するものと予想される。現在、isoformのそれぞれに特異的な単クローン抗体を用いて免疫組織化学により両isoformの分布を調べている。

为了研究蛋白质复合成分之间的相互作用，这些蛋白质复合成分被认为直接参与发射机的释放以及cinnafins的功能，我们首先在复杂成分之间进行了报道，我们进行了实验，例如分析复杂组件之间的相互作用，并在两个Isoform cinnafins 1和2中识别出比例1和2的mRNA表达位点之间的相互作用，并在鼠更大的cinnafins表达位点中识别出鼠的脑部和2个脑的相互作用。（1）将大鼠脑膜级分的Triton X-100提取物进行甘油密度梯度离心，免疫沉淀，抗蛋白质复合物成分抗体，并通过免疫印迹鉴定沉淀物。结果表明，突触抗体，语法，SNAP-25，VAMP和CINNAFIN主要存在为7S颗粒，并且其他不含vamp和cinnafin的复合物。复合物的这种异质性表明，复合物的形成和解决方案中存在几个中间阶段，以及如何控制其动力学是一个重要的问题，这是一个重要的问题。（2）重组Cinnafin可以代替内源性cinnafin，形成含有语法素等的7S颗粒。该复合物的特性正在研究中。（2）Cinnafins 1和2的mRNA几乎限于大脑，并在睾丸等中略微表达。此外，大脑中两者的分布在小脑，丘脑，丘脑，嗅球，大脑皮层等中都显着差异。目前，使用对每种同工型特异的单克隆抗体来研究两种同工型的分布。