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神経伝達物質放出機構の分子カスケード

神经递质释放机制的分子级联

基本信息

批准号：
08680836
负责人：
阿部輝雄
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680836/
关键词：
伝達物質放出シナ-フィンシナプス小胞

项目摘要

伝達物質放出に直接関与すると考えられる蛋白質複合体成分間の相互作用、ならびに複合体構成成分のうち私達が最初に報告したシナ-フィンの機能を追究するため、複合体成分間の相互作用の解析、ラット脳における二つのisoformシナ-フィン1、2のmRNAの発現部位の同定等の実験を行い、以下のような結果を得た。(1)ラット脳膜分画のTriton X-100抽出物をグリセロール密度勾配遠心にかけ、蛋白質複合体成分に対する抗体による免疫沈降後、イムノブロットによって沈降物を同定した。その結果、シナプトダクミン、シンタキシン、SNAP-25、VAMP、シナ-フィンはほとんどが7Sの粒子として存在すること、このほかにVAMPおよびシナ-フィンを含まない複合体が存在することなどが明らかになった。この様な複合体の不均一性は複合体の形成、解消過程にいくつかの中間段階があることを示唆しており、その動態がいかにして制御されるかが今後解明すべき重要な課題である。(2)組み換シナ-フィンは内在性のシナ-フィンを置換してシンタキシン等を含む7S粒子を形成できる。この複合体の性質を検討中である。(2)シナ-フィン1、2に対するmRNAは脳にほとんど限られており、精巣等にわずかに発現している。また、両者の脳内分布は小脳、視床、嗅球、大脳皮質等において有意に異なる。したがって両蛋白質は異なった生理的意味を有するものと予想される。現在、isoformのそれぞれに特異的な単クローン抗体を用いて免疫組織化学により両isoformの分布を調べている。

The interaction between the components of protein complex, the analysis of the interaction between the components of protein complex, the identification of the mRNA expression sites of isoform 1 and 2, and the investigation of the function of the components of protein complex are directly related to the release of substances. (1)Triton X-100 extract from the membrane analysis was isolated from the protein complex by density matching, and the protein complex composition was identified by antibody immunoprecipitation and precipitation. As a result, the particles of 7S exist in Sisu, SNAP-25, VAMP, and Sisu, and the complex of VAMP and Sisu exists in this case. The heterogeneity of the complex is an important problem for future understanding of the formation and dissolution of the complex. (2)The formation of particles containing 7S in the formation of particles containing 7S The properties of the complex are discussed. (2)The expression of mRNA in mRNA 1 and mRNA 2 is limited to the expression of mRNA in mRNA 1 and mRNA 2. The distribution in the cortex is different from that in the retina, optic bed, olfactory bulb and cortex. The protein is different from the physiological one. Now, isoform is used to modulate the distribution of isoform by immunohistochemistry.