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神経伝達物質放出の分子機構

神经递质释放的分子机制

基本信息

批准号：
07680840
负责人：
阿部輝雄
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680840/
关键词：
伝達物質放出シナプス小胞膜融合

项目摘要

シナプスにおける伝達物質放出はシナプス小胞とシナプス前膜の融合とそれに続く開口分泌によって起こる。私達を含めて世界のいくつかのグループの最近の研究によってこの過程に直接関与する蛋白質複合体(融合複合体)が同定された。しかし、この複合体の構成蛋白質(syntaxin 1、VAMP/synaptobrevin、SNAP-25、rab3A、synaptotagmin、NSF、SNAPs)間の相互作用とCa2+によるその変化についてはほとんどわかっていない。本研究において私達はこの複合体の成分として私達自身が発見した19a蛋白質を追究し、その本体を明らかにした。単クローン抗体SPM-1を用いて融合複合体を精製し、電気泳動によって19a成分を単離した後、CNBr分解した。得られたペプチドを電気泳動にて分離し、蛋白質シークエンサーによってその部分アミノ酸配列を決定した。PCRによって得られたこの配列に対するヌクレオチドをプローブにしてウシ脳cDNA libraryをスクリーニングし、19a蛋白質に対するcDNAをクローニングした。19a蛋白質(synaphinと命名)は従来知られていなかった新規蛋白質で、グルタミン酸とリジンに富み、膜貫通部位等の疎水性部位は全く存在しない。上記の部分アミノ酸配列に対するペプチドを合成して、19a蛋白質に対する抗体を作製した。この抗体を用いたイムノブロットによる解析の結果、この蛋白質はほとんどが、細胞質に存在すること、また、神経系に局在することが判明した。したがって、synaphinは融合複合体に結合およびそこから解離すると推測される。ラット脳のcDNA libraryの解析により、一次構造が互いにきわめてにているsynaphinlと2が同定された。これらは異なった遺伝子を由来するものと考えられる。現在、この2種の蛋白質と融合複合体の他の成分との相互作用を詳細に検討中である。

The release of substances from the membrane of the cell and the secretion of substances from the opening of the cell The protein complexes (fusion complexes) directly involved in the process of protein synthesis are identified in recent studies. The interaction between the constituent proteins of the complex (syntaxin 1, VAMP/synaptobrevin, SNAP-25, rab3A, synaptotagmin, NSF, SNAPs) and Ca2 +-induced transformation. In this study, the components of the complex and the protein itself were investigated. The SPM-1 antibody was purified from the fusion complex by electroporation, and the 19a component was isolated by CNBr decomposition. To determine the molecular structure of the protein in the cell PCR was used to detect the sequence of the cDNA library. The cDNA library was used to detect the sequence of the cDNA library. 19a protein (synaphin) is known to exist in all aqueous sites such as protein, acid, rich, membrane-penetrating sites, etc. Note that some of the above acid sequences were synthesized and antibodies were produced against the 19a protein. The results of the analysis of the antibody showed that the protein was present in the cytoplasm and the nervous system. It is speculated that the fusion complex is bound and dissociated. The analysis of cDNA library is based on the structure of the cDNA library, and the structure of the cDNA library is based on the structure of the cDNA library This is the first time I've ever seen a woman. Now, the interaction between these two proteins and other components of fusion complexes is discussed in detail.