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神経終末内メンブレントラフィックの細胞質タンパク質による制御

细胞质蛋白控制神经末梢内的膜交通

基本信息

批准号：
16044215
负责人：
阿部輝雄
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

神経終末内におけるシナプス小胞の開口放出とエンドサイトーシスはサイトゾルタンパク質によって厳密に制御されている。本研究はこれらの過程におけるサイトゾルタンパク質nSec1/Munc18-1、トモシンおよびシナーフィン/コンプレキシンの役割を明らかにする目的で行われ、以下の結果が得られた。(1)伝達物質放出におけるシナーフィンの作用速度を知る目的で、ヤリイカ巨大シナプスのシナプス前末端にシナーフィンのSNARE複合体結合部位のケージド・ペプチドを注入した。UV照射により、このペプチドを瞬間的に活性化すると、SNARE複合体に結合してシナプス小胞の開口放出を阻害する。この阻害速度を測定し、時定数約180ミリ秒を得た。(2)シナーフィン1,2のC末端近くにカゼインキナーゼII(以下CKII)によるリン酸化予想部位(Ser-115)が存在する。このリン酸化の生理的意義を探る実験を開始した。この予想部位を含むリン酸化ペプチドを抗原として、この部位がリン酸化されたシナーフィンに特異的に反応するポリクローン抗体を作製した。CKIIによってリン酸化された組換えシナーフィン1,2のみがこの抗体と反応し、非リン酸化シナーフィン1,2は全く反応しなかった。タンパク質脱リン酸化酵素阻害剤の存在下でラット脳可溶性分画から免疫沈降したシナーフィン1,2のうち、1のみがこの抗体と反応した。したがって脳内にはSer-115がリン酸化されたシナーフィン1が存在する。(3)Cre-LoxP系を用いて、nSec1/Munc18-1およびトモシンの脳部位特異的欠損マウスの作製を行っている。前者についてはヘテロマウスが得られている。

At the end of the day, the opening of the small cell was released at the end of the day. The purpose of this study is to improve the performance of nSec1/Munc18-1 in the course of this study. The following results are satisfactory. The main results are as follows: (1) the speed of action, the speed of action. After UV irradiation, the activation and SNARE complex in the transients were activated, and the small cell opening was blocked by the combination of the SNARE complex and the microcell. The speed of resistance is measured and the time is about 180 minutes per second. (2) the presence of acid in the desired site (Ser-115) near the C end of the II (the following CKII). A probe into the meaning of acidification physiology the beginning of a long period of time. There are antigens in the desired parts, such as antigens, antigens and antibodies. CKII antigens were acidified in various ways, and the antibodies were detected in 1, 2, 4, 4, 5, 5, 5, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 4, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6, 6 In the presence of acidifying enzyme inhibition, immune sedimentation, immune sedimentation, antibody, antibody, and antibody were detected. There is a problem in the presence of Ser-115, acid, acid and acid. (3) Cre-LoxP is a system that uses nSec1/Munc18-1 to make sure that there is a lack of information in the special part of the body. In the former, I would like to know if you have to pay attention to me.