Cep57・Cep57L1を基軸とした中心小体間結合の分子機構の解明

基于Cep57/Cep57L1阐明中心粒间结合的分子机制

• 批准号: 22KJ0633
• 负责人: 伊藤 慶
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ0633/
• 关键词: 中心体; 中心小体

2022年度は、中心小体間接合と細胞周期の関係の詳細を明らかにするため、STED顕微鏡を用いた中心小体の観察と、薬剤実験を実施した。これまでの研究で、中心体タンパク質のCep57とCep57L1の発現を同時に抑制すると中心小体が間期のうちに早期分離することがわかっていたが、その正確な時期は不明であった。そこでまず、細胞周期マーカーとＤＮＡ複製阻害剤を用いて表現型が生じる時期を解析した。その結果、Cep57・Cep57L1発現抑制細胞の中心小体の分離は必ずS期中期以降であり、S期前期では接合が維持されていることが明らかになった。また阻害実験によって、CDK2-サイクリンAの活性がこの違いに重要であることが示された。続いて、中心小体間接合に関わる分子の要求性の変化の原因を知るため、中心小体をSTED顕微鏡で観察した。通常、Ｓ期中期以降の中心小体は垂直に接合しているが、CDK2-サイクリンAを阻害した条件では鋭角から鈍角まで幅広い角度を取っており、すなわち角度が不安定であった。この結果から、元々流動的なCep57やCep57L1がCDK2-サイクリンAの活性によって固く変化し、このことで中心小体の角度が安定し、両分子が接合維持に寄与するようになると推測している。Cep57と相互作用するタンパク質PCNTは、MOPDという遺伝病の原因遺伝子である。MOPDのもう一つの原因遺伝子は、マイナースプライソソームを構成するRNU4ATACである。RNU4ATACとPCNT及びCep57の関係を解析し、結果をCold spring harbor Asia RNA-meetingにて発表、Outstanding presentation awardを獲得した。また、論文由来の情報とデータベースの情報を元に実験計画を補助するシステムを開発し、実験医学2023年1月号に発表した。

In 2022, the relationship between centrosome junction and cell cycle was clarified, and the observation of centrosome by STED microscope was carried out. This study was conducted to determine the occurrence of centrosome Cep57 and Cep 57L1, and to determine the exact time of centrosome separation. The expression of DNA in the cell cycle was analyzed. Cep57·Cep57L1 appeared to inhibit the separation of centrosome from cells in the middle and early stages of S phase. The activity of CDK2-CDR3 is important for the prevention of cancer. The reasons for the change of molecular requirements related to the junction between centrosomes were investigated by microscopes. Usually, the centrosome descending in the middle of S phase is vertically jointed, CDK2-S1-S1-S2-S1-S1-S2-S1-S1 S2 S1 S1 As A result, the mobility of Cep 57 and Cep57L1 in CDK2-A activity is stable, the angle of centrosome is stable, and the molecular conjugation is maintained. Cep57: interaction, quality, PCNT, MOPD, cause of disease MOPD is composed of RNU4ATAC. Analysis of RNU4ATAC, PCNT and Cep57, Results of Cold Spring Harbor Asia RNA-meeting, Outstanding presentation award The information on the origin of the paper and the information on the development of the project were published in January 2023.

项目成果

情報処理システム、情報処理方法、及びプログラム

信息处理系统、信息处理方法以及程序

• 发表时间: 2017

LEXAS: a web application for life science experiment search and suggestion

LEXAS：生命科学实验搜索和建议的网络应用程序

• DOI: 10.1101/2021.12.05.471323
• 发表时间: 2021
• 期刊: bioRxiv
• 作者: Kei K Ito;Yoshimasa Tsuruoka;Daiju Kitagawa
• 通讯作者: Daiju Kitagawa

Minor spliceosome removes introns of centrosome-related genes to ensure proper number of the centrosome

小剪接体去除中心体相关基因的内含子，以确保中心体的适当数量

• 发表时间: 2022
• 作者: Kei K Ito;Minhe Xu;Shoji Hata;Daiju Kitagawa
• 通讯作者: Daiju Kitagawa

中心小体間の繋ぎ止めによる中心体過剰複製と染色体不安定性を防ぐメカニズムの解明

阐明通过中心粒之间的束缚防止中心体过度复制和染色体不稳定的机制

• 发表时间: 2021
• 作者: Kei K Ito;Minhe Xu;Shoji Hata;Daiju Kitagawa;伊藤慶
• 通讯作者: 伊藤慶

実験医学「クローズアップ実験法 任意のヒト遺伝子に関わる生命科学実験の検索・提案ウェブツール「LEXAS」」

实验医学“特写实验方法“LEXAS”用于搜索和提出与任何人类基因相关的生命科学实验的网络工具”

• 发表时间: 2023
• 作者: 伊藤慶;鶴岡慶雅;北川大樹
• 通讯作者: 北川大樹