機能性プロバイオティクスによる疾患治療と予防への挑戦

使用功能性益生菌治疗和预防疾病的挑战

• 批准号: 22K19753
• 负责人: 桑原 知巳
• 金额: $ 4.08万
• 依托单位: Kagawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19753/
• 关键词: 腸内細菌; ブチリカム菌; 自己免疫疾患; 実験的自己免疫性脳脊髄炎; 酪酸菌; 表層提示; プロバイオティクス; 自己抗原; 制御性T細胞

腸内細菌が宿主の免疫系に及ぼす役割が次々と明らかにされ、腸内細菌の代謝産物である酪酸が過剰な免疫を抑制する制御性T細胞の分化誘導因子であることが報告されている。本研究では酪酸産生菌であるブチリカム菌に自己免疫性疾患に関連する自己抗原を発現させ、この抗原特異的な制御性T細胞を誘導することにより、自己抗原に対する過剰免疫応答をのみを抑制する手法を確立することを目的としている。本年度は、実験的自己免疫性脳脊髄炎モデルマウスの自己抗原であるMOGペプチドを効率よく発現する自己抗原発現ブチリカム菌の作製を試みた。C. butyricum JCM1391株由来N-acetylmuranoyl-L-alanine amidase遺伝子のcell wall binding repeatモチーフ（pfam01473）とMOGペプチド遺伝子およびHA-tagの融合遺伝子をE. coli-Clostridium分泌発現シャトルベクター pMTL83151にE. coliを宿主としてクローン化した。構築したプラスミドを接合伝達によりC. butyricum JCM1391株に導入した。作製した組換えブチリカム菌におけるMOGの発現をWestern blot法で確認したところ、培養上清中にMOGを高度に発現していることが確認できた。

Intestinal bacteria が の host immune system に and ぼ す "cut が times 々 と Ming ら か に さ れ, intestinal bacteria の metabolites で あ る butyric acid が before turning な immune を inhibit す る system royal sex differentiation inducing factor で の T cells あ る こ と が report さ れ て い る. This study で は butyric acid bacteria produce で あ る ブ チ リ カ ム bacteria に oneself immunity disease に masato even す る their antigen を 発 now さ せ, こ の royal sex T cell antigen specific な system を induced す る こ と に よ り, antigen に す seaborne る before turning the immune 応 answer を の み を inhibit す る gimmick を establish す る こ と を purpose と し て い る. は this year, be 験 of oneself immunity 脳 spinal marrow inflammation モ デ ル マ ウ ス の their antigen で あ る MOG ペ プ チ ド を sharper rate よ く 発 now す る their antigen 発 now ブ チ リ カ ム bacteria の cropping を try み た. The c-butyricum JCM1391 strain is derived from N-acetylmuranoyl-L-alanine amidase, which has 伝 offspring and <s:1> cell wall binding Repeat モ チ ー フ (pfam01473) と MOG ペ プ チ ド posthumous son 伝 お よ び HA - tag の fusion posthumous son 伝 を e. coli - Clostridium secretion 発 now シ ャ ト ル ベ ク タ ー pMTL83151 に e. coli を host と し て ク ロ ー ン change し た. Construct a 伝 たプラス ドを ドを junction 伝 to によ <s:1> C. butyricum JCM1391 に introduction た た. Cropping し た group in え ブ チ リ カ ム bacteria に お け る MOG の 発 を now Western blot method で confirm し た と こ ろ, culture supernatant of に MOG を highly に 発 now し て い る こ と が confirm で き た.