ノイラミニダーゼ遺伝子の導入による乳酸菌の機能改良に関する研究

导入神经氨酸酶基因改善乳酸菌功能的研究

• 批准号: 14770118
• 负责人: 桑原 知巳
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770118/
• 关键词: ノイラミニダーゼ; 乳酸菌; 免疫アジュバン; 腸管免疫; ワクチン; 腸管感染症; 遺伝子組換え; 粘膜IgA; 免疫アジュバンド; ノイラニニダーゼ; アジュバンド; IgA; コレラ毒素; 腸内細菌

Lactococcus lactis YIT2081株にClostridium perfringens, Salmonalla TypyhimuriumおよびBacteroides fragilis由来のノイラミニダーゼ遺伝子nanHを導入し、ノイラミニダーゼを産生する乳酸菌を作成した。これらのうち、最も培養上清中のノイラミニダーゼ活性が高かった菌株はC.perfringensのnanH遺伝子を導入したL.lactis YIT2081(pBCnanH1)であり、本菌株をマウスに経鼻投与すると抗原として用いた卵白アルブミンに対する糞便中の特異的IgA量がベクターコントロール群の3.4倍に上昇したことから、本菌株は粘膜アジュバントとして有用であると考えられた。しかしながら、経口接種した乳酸菌の腸管への定着率は極めて低いことが知られており、本年度はL.lactis YIT2081(pBCnanH1)の腸管への定着率を調べた。ノイラミニダーゼを産生するL.lactis YIT2081(pBCnanH1)と対照菌株であるL.lactis (pBE31)を10mlのMRS broth (Em 5ug/ml)で30℃16時間培養し、新鮮な5mlのMRS brothで再懸濁したものをそれぞれ7週齢の雄性ラット4匹に、1ml/匹の量を経口投与した。糞便は輸送用培地に採取したものを100倍と10,000倍に希釈し、TATAC(Em 20μg/ml)培地に塗布した。これを30℃で3日間培養し、コロニーを計数した。投与生菌数はL.lactis (pBE31)が1.0×10^9 CFU/ml、L.lactis YIT2081(pBCnanH1)が0.9×10^9 CFU/mlであった。各菌株の糞便中の生菌数測定の結果、両菌株とも投与8時間後までは全てのラットの糞便中から分離されたが、24時間以降では対照群の1個体にのみL.lactisが検出された。以上の結果より、ノイラミニダーゼ遺伝子の導入は、L.lactisの腸管への定着率に影響を及ぼさないことが明らかとなった。

The origin of Lactococcus lactis YIT2081 strain Clostridium perfringens, Salmonalla Typyhimurium strain Bacteroides fragilis is different from that of Lactobacillus spp. In the supernatant of the supernatant, the strain C.perfringens nanH isolated from the supernatant was inoculated into the virus L.lactis YIT2081 (pBCnanH1), and this strain was intranasally administered with antigens. The amount of IgA in the stool was measured with the amount of specific IgA in the stool. The strain was isolated from the mucous membrane of this strain. The determination rate of lactic acid bacteria (Lactobacillus) by mouth is very high, and that of L.lactis YIT2081 (pBCnanH1) is very high this year. The strain L.lactis (pBE31) 10ml MRS broth (Em 5ug/ml) was incubated at 30 ℃ for 16 hours, and the new strain 5ml MRS broth was incubated at 30 ℃ for 16 hours. the new strain was incubated at 30 ℃ for 16 hours, and the new strain was incubated at 30 ℃ for 16 hours. the new strain was incubated at 30 ℃ for 16 hours, and the new strain was incubated at 30 ℃ for 16 hours. Please send it to the pedestal to pick up the dough, 10000 times, and TATAC (Em 20 μ g

项目成果

K.Kuroiwa, H.Nakayama, T.Kuwahara et al.: "Augmenting effect of acetic acid for acidification on bactericidal activity of hypochlorite solution."Lett.Appl.Microbiol.. 36. 46-49 (2003)

K.Kuroiwa、H.Nakayama、T.Kuwahara 等人：“酸化乙酸对次氯酸盐溶液杀菌活性的增强作用。”Lett.Appl.Microbiol.. 36. 46-49 (2003)

Inhibitory effects of Centella asiatica on azoxymethane-induced aberrant crypt focus formation and carcinogenesis in the intestines of F344 rats

• DOI: 10.1016/j.fct.2004.06.022
• 发表时间: 2004-12-01
• 期刊: FOOD AND CHEMICAL TOXICOLOGY
• 影响因子: 4.3
• 作者: Bunpo, P;Kataoka, K;Ohnishi, Y
• 通讯作者: Ohnishi, Y

H.Shibata, C.Shirakata, H.Kawasaki, Y.Sato, T.Kuwahara et al.: "Flavone markedly affects phenotypic expression of β-lactam resistance in methicillin-resistant Staphylococcus aureus strains isolated clinically."Biol.Pharm.Bull.. 26. 1478-1483 (2003)

H. Shibata、C. Shirakata、H. Kawasaki、Y. Sato、T. Kuwahara 等人：“黄酮显着影响临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株中 β-内酰胺耐药性的表型表达。”Biol.Pharm.Bull .. 26. 1478-1483 (2003)

Kuwahara, T., et al.: "Physical and genetic map of the Bacteroides fragilis YCH46 chromosome"FEMS Microbiol. Lett.. 207. 193-197 (2002)

Kuwahara, T. 等人：“脆弱拟杆菌 YCH46 染色体的物理和遗传图谱”FEMS Microbiol。

Simultaneous detection of Bacteroides fragilis group species by leuB-directed PCR.

通过 leuB 引导的 PCR 同时检测脆弱拟杆菌群。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Med.Invest. 52・1-2
• 作者: Masaki M.et al.;Arimochi H.et al.;Nakanishi S.et al.;Miki T.et al.
• 通讯作者: Miki T.et al.