筋ジストロフィー症に対する細胞移植治療とリハビリテーション

肌营养不良症的细胞移植治疗和康复

基本信息

批准号：
13J04777
负责人：
竹中菜々
金额：
$ 2.53万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J04777/
关键词：
筋ジストロフィー症細胞移植治療リハビリテーションデュシェンヌ型筋ジストロフィー症 Dystrophin陽性線維ウルリッヒ型筋ジストロフィー症間葉系前駆細胞 6型コラーゲン iPS細胞間葉系間質細胞６型コラーゲン UCMD

项目摘要

デュシェンヌ型筋ジストロフィー症（DMD）に対する細胞移植治療については、これまでにも多くの研究結果が報告されてきた。しかし、DMDマウスの骨格筋機能を正確に、かつ経時的に評価する方法が確立されていなかったため、移植による治療効果は組織学的な解析でしか評価されておらず、運動機能を評価した報告はほとんど無かった。そこで、我々は、重度免疫不全DMDモデルマウス（DMD-null/NSG mouse）の運動機能を評価する方法の確立を目指し実験を行った。さらに、ヒト不死化筋芽細胞株(Hu5/KD3)を使用し、細胞移植治療後のDMDマウスの運動機能解析結果と、組織学的解析結果（移植細胞に由来するDystrophin陽性筋線維数）との相関関係を示すことを目指した。平成26-27年度で、DMDマウスの筋収縮力を、経時的に、かつ、再現性高く測定する方法を確立させた。さらに、移植細胞の生着数（Dystrophin陽性筋線維数）の増加に比例して、発揮される筋力も増加することも確認できた。このように、DMDマウスに対する細胞移植の治療効果を客観的に再現性高く、組織学的解析と運動機能解析の両面から証明されたのは今回のこの研究がはじめてである。現在、論文投稿に向けて準備を進めている。さらに、平成27-28年度は、リハビリテーション介入実験を開始した。細胞移植治療後に加えるリハビリテーションプログラムには、麻酔下での電気刺激による骨格筋等尺性収縮トレーニングを採用した。その結果、細胞移植治療後のDMDマウスに筋収縮トレーニングを負荷すると、移植細胞の生着率がより向上し、Dystrophin陽性線維数が約三倍増加すること、そしてそれに伴って、筋力も向上することを明らかとした。現在は、リハビリテーションプログラムの至適化（頻度、強度、期間、等）、及び、メカニズムの解明に向け、引き続き実験を進めている

许多研究先前已经报道了Duchenne肌肉营养不良（DMD）的细胞移植治疗。但是，由于尚未确定准确的方法，并且随着时间的推移评估DMD小鼠的骨骼肌功能，因此仅通过组织学分析对移植的治疗效果进行了评估，并且很少有报道评估运动功能。因此，我们进行了一项实验，以建立一种评估严重免疫缺陷DMD模型小鼠（DMD-NULL/NSG小鼠）中运动功能的方法。此外，使用人生永生的成肌细胞细胞系（HU5/KD3），我们旨在在细胞移植治疗后DMD小鼠的运动功能分析结果与组织学分析结果（源自植入细胞衍生的dmystrophin阳性肌纤维的数量）之间的相关性）。在2014 - 2015年，建立了一种方法，可以随着时间的流逝和高可重现性测量DMD小鼠的肌肉收缩力。此外，已经证实，施加的肌肉力量还与植入的细胞数量增加（肌营养不良蛋白阳性肌肉纤维）成比例地增加。这是该研究首次证明细胞移植对DMD小鼠的治疗作用，并通过组织学和运动功能分析。目前，我正在准备提交论文。此外，在2015 - 2016年，我们开始了康复干预实验。在麻醉下使用电骨骼肌等距收缩训练进行细胞移植治疗后添加的康复计划。结果，揭示了细胞移植治疗后将肌肉收缩训练应用于DMD小鼠时，进一步改善了移植细胞的植入率，并且肌营养不良蛋白阳性纤维的数量增加了大约3次，因此，肌肉强度也得到了改善。当前，我们正在继续实验，以优化康复计划（频率，强度，持续时间等）并阐明机制。