老化細胞由来エクソソームの機能解析

衰老细胞来源的外泌体的功能分析

• 批准号: 13J02194
• 负责人: 中村 亜由美
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J02194/
• 关键词: 老化細胞; エクソソーム; マイクロRNA

本年度は老化細胞由来エクソソームの網羅的解析、生物活性解析、分泌メカニズム解明の目的で以下の通り実施した。1、老化細胞由来エクソソームの網羅的解析マイクロRNAについてはマイクロアレイにより、蛋白質についてはMS解析により網羅的に解析した。これらをもとに研究を進め、老化細胞由来エクソソームは継代早期の若い細胞と比較して、エクソソーム1粒子中に含有されるRNA量が増加していること、また、一部のマイクロ即Aの含有量が特異的に増加していることが明らかになった。さらに、これらマイクロRNAの機能等についてはこれまでにほとんど報告がなく、老化細胞由来エクソソームの特異的な機能の存在が示唆された。2、老化細胞エクソソームの生物活性解析申請当初は老化細胞由来エクソソームが癌細胞の細胞死を誘導する可能性を検証していたが、その後、エクソソームの添加量等を検討することにより、より詳細な生物活性の解析を目指すことにした。その結果、老化細胞由来エクソソームが癌細胞の増殖能、生存能、浸潤能を抑制することが明らかになった。3、エクソソーム分泌メカニズム解明これまでの報告によりエクソソームの生合成や分泌への関与が示唆されている遺伝子Maspin、TSAP6、CHMP4Cに着目し、これらが老化細胞でのエクソソーム分泌に関与している可能性を検証した。まず細胞老化に伴う各遺伝子の発現量を調べると特にMaspin、CHMP4Cで顕著に増加していることが明らかになった。そこでこれら遺伝子をノックダウンしたところエクソソーム分泌量は減少し、一方、過剰発現させるとエクソソーム分泌は増加した。以上より、老化細胞におけるエクソソームの分泌メカニズムとしてMaspin、CHMP4Cが開与していることが明らかになった。

This year, the analysis of the origin of aging cells, the analysis of biological activity, and the purpose of secretion of aging cells were carried out. 1. Analysis of aging cell origin and network: RNA analysis, protein analysis, MS analysis The amount of RNA contained in some of the cells was increased during the early stages of the aging process. In addition, the function of RNA is not reported, and the existence of specific functions of aging cells is indicated. 2. Analysis of biological activity of aging cells. At the beginning, the possibility of inducing cell death of aging cells was discussed. As a result, aging cell origin is stable, and growth, survival, and infiltration of cancer cells are inhibited. 3. Maspin, TSAP6 and CHMP4C are the main factors affecting the secretion of aging cells. Cell aging is accompanied by the increase in the amount of protein produced by Maspin and CHMP4C. The amount of good secretion decreased, and the amount of good secretion increased. The above mentioned cells are in good condition and the secretion of Maspin and CHMP4C is in good condition.