抗腫瘍活性物質アプリロニンAの作用機序に関する研究

抗肿瘤活性物质aprironin A作用机制研究

• 批准号: 13J01175
• 负责人: 平山 裕一郎
• 金额: $ 1.32万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013 至 2014
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J01175/
• 关键词: 天然物化学; ケミカルバイオロジー; タンパク質間相互作用; 分子プローブ; アクチン; チューブリン; アプリロニンA; 標的タンパク質同定

アプリロニンA(ApA)は強力な抗腫瘍活性を有する海洋産マクロライドである。標的タンパク質としてアクチンに作用することが知られていたが、アクチンとの作用のみではApAの強力な抗腫瘍活性を説明できず、その作用機序は不明であった。これまでに申請者はApAの作用機序の解明を目的に、ApAをリガンドとした光親和性ビオチンプローブを合成し、これを用いて新規標的タンパク質としてチューブリンの同定に成功している。さらにApAがアクチン存在下でチューブリン重合阻害活性を示すことを見出していた。前年度に精製チューブリンを用いたin vitroでの相互作用解析を進め、ApAとチューブリンの相互作用にアクチンが必要であることを明らかにした。この結果からApAがアクチンとチューブリンの両者と結合し三元複合体を形成していることが強く示唆された。そこで今年度はこの三元複合体の結合様式を明らかにするために、ゲルろ過HPLCによる三元複合体の精製とその結合様式の解析、およびビアコアを用いたSPRによる三元複合体相互作用の解析を行った。結果、ApAがアクチンモノマーおよびチューブリンヘテロダイマーと1:1:1の複合体を形成していることを明らかにし、この複合体の結合能が十分に強いことを明らかにした。アクチンやチューブリンに結合する化合物は多く知られているが、アプリロニンAのように両者に同時に結合して強力な活性を示すことはこれまで報告例がなく、ApAが興味深い作用機序を有する天然物であることがわかった。

Youdaoplaceholder0 な A(ApA) strong な anti-swelling activity を available in する Marine products な ロラ ロラ ドである ドである ドである. Mark タ ン パ ク qualitative と し て ア ク チ ン に role す る こ と が know ら れ て い た が, ア ク チ ン と の role の み で は ApA の powerful な swollen sores active resistance を illustrate で き ず, そ の unknown function machine sequence は で あ っ た. こ れ ま で に applicants は ApA の function machine sequence の interpret を purpose に, ApA を リ ガ ン ド と し た light affinity ビ オ チ ン プ ロ ー ブ を synthetic し, こ れ を with い て new rules underlying タ ン パ ク qualitative と し て チ ュ ー ブ リ ン の with fixed に successful し て い る. さ ら に ApA が ア ク チ ン presence で チ ュ ー ブ リ ン reclosing resistance against active を shown す こ と を shows し て い た. Before the annual に refined チ ュ ー ブ リ ン を with い た in vitro で の interaction parsing を め, ApA と チ ュ ー ブ リ ン の interaction に ア ク チ ン が necessary で あ る こ と を Ming ら か に し た. こ の results か ら ApA が ア ク チ ン と チ ュ ー ブ リ ン の struck the と combining し ternary complex を form し て い る こ と が く and shown strong sucking さ れ た. そ こ で our は "こ の ternary complex の combined with others in type を Ming ら か に す る た め に, ゲ ル ろ through HPLC に よ る ternary complex の refined と そ の combined with others in type の parsing, お よ び ビ ア コ ア を with い た SPR に よ る ternary complex interaction の parsing line を っ た. Results, ApA が ア ク チ ン モ ノ マ ー お よ び チ ュ ー ブ リ ン ヘ テ ロ ダ イ マ ー と : の complex を form し て い る こ と を Ming ら か に し, こ の complex の binding energy が very strong に い こ と を Ming ら か に し た. ア ク チ ン や チ ュ ー ブ リ ン に combining す る compound は く know more ら れ て い る が, ア プ リ ロ ニ ン A の よ う に struck the に に at the same time combining し て を and shown strong な activity す こ と は こ れ ま で report cases が な く, ApA が tumblers deep い machine sequence を have す る natural things で あ る こ と が わ か っ た.

项目成果

アメフラシ由来の抗腫瘍性物質アプリロニンAの作用機序解明

阐明来自海兔的抗肿瘤物质 aprilonin A 的作用机制

• 发表时间: 2013
• 作者: 平山裕一郎;米田耕三;山岸航大;北将樹;木越英夫
• 通讯作者: 木越英夫

Analysis of the Interaction between Aplyronine A and Its Target Proteins

Aplyronine A与其靶蛋白相互作用分析

• 发表时间: 2014
• 作者: Yuichiro Hirayama;Masaki Kita;Tomohiro Suzuki;Hirokazu Kawagishi;Hideo Kigoshi
• 通讯作者: Hideo Kigoshi