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標的蛋白質との相互作用における天然変性蛋白質αシヌクレインの構造形成と凝集

天然变性蛋白 α-突触核蛋白在与靶蛋白相互作用过程中的结构形成和聚集

基本信息

批准号：
13F03383
负责人：
河田康志
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

蛋白質の構造変化から生じる凝集体やアミロイド線維形成に起因する神経変性病の予防や治療に貢献する基礎的研究のために，アルツハイマー病の原因ペプチドであるAβ42とパーキンソン病の原因蛋白質であるαシヌクレインのアミロイド線維形成の抑制を分子シャペロンの一種であるシャペロニンGroELの頂上ドメイン(AD)を用いて調べた。我々はGroELが様々な基質蛋白質をその頂上ドメインで結合することをこれまでの研究で明らかにしてきており，本研究ではその頂上ドメインのみを蛋白質工学的に切り離して大腸菌で大量発現させ，精製して使用した。ADをモル比で５倍量添加してαシヌクレインのアミロイド線維形成反応を追跡するとほぼ完全にアミロイド線維形成反応が抑制されることが明らかになった。さらに詳細なADの添加量比をAβ42で調べたところ，ADが1倍等量存在下で90%に，10倍等量で20%に，20倍等量でほぼ完全にアミロイド線維形成が抑制されることが分かった。これらのADの作用が蛋白質の凝集・アミロイド線維形成に対して普遍的であるかどうかを，病気とは関連していないがある変性条件下で典型的なアミロイド線維を形成することを我々が独自に発見しているGroES蛋白質でも同様に調べた。その結果，1倍等量で40%に，2倍等量で20%に，4倍等量のＡＤでほぼ完全に線維形成が抑制された。これらの結果から, ADはアミロイド線維凝集を形成するタンパク質に普遍的に相互作用して，その伸張反応を停止させて凝集抑制をする働きがあることを初めて明らかにした。また，それらの相互作用の親和性を水晶振動子マイクロバランス装置を用いて定量的に調べることにも成功した。この研究結果は，ADを用いればアルツハイマー病やパーキンソン病などに代表される脳神経変性病などの予防に利用できる可能性を示しており，新たなタンパク性製薬として期待される。

Protein structure changes, changes in aggregation, changes in protein structure, changes in protein structure, changes in We have studied the isolation, purification and use of protein engineering in the field of protein engineering in the field of protein engineering in the top of GroEL matrix protein. AD is added 5 times more than AD, and the linear dimension of AD is completely suppressed. AD addition ratio Aβ42 is adjusted to 90%, 10 times and 20 times respectively. The role of AD in protein aggregation, protein formation, and protein regulation is common, and disease is associated with typical protein aggregation and protein formation under varying conditions. As a result, 1-fold equivalent is 40%, 2-fold equivalent is 20%, 4-fold equivalent is AD, and complete linear dimension formation is inhibited. As a result, it has become clear that AD has a widespread interaction with the natural substance that forms agglutination of amyloid strands, and its stretching reaction stops and agglutination is inhibited. The interaction between the crystal oscillator and the crystal oscillator is successful. The results of this study indicate that AD can be used to prevent and treat diseases.