EBNA AND OTHER VIRAL PRODUCTS IN EBV TRANSFORMED CELLS
EBV 转化细胞中的 EBNA 和其他病毒产物
基本信息
- 批准号:3168117
- 负责人:
- 金额:$ 7.57万
- 依托单位:
- 依托单位国家:美国
- 项目类别:
- 财政年份:1981
- 资助国家:美国
- 起止时间:1981-09-30 至 1991-04-30
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:DNA binding protein DNA directed DNA polymerase Epstein Barr virus affinity chromatography antiserum antiviral antibody biopsy cell differentiation cell growth regulation chemical fingerprinting complementary DNA epithelium genetic library genetic mapping human subject immunochemistry immunogenetics membrane proteins microorganism immunology molecular cloning monoclonal antibody nasopharyngeal neoplasms nucleoproteins oncogenic virus protein structure tissue /cell culture transfection viral carcinogenesis virus DNA virus antigen virus classification virus genetics virus protein virus replication
项目摘要
The purpose of this project is to continue the study of the EBV-
encoded, growth-transformation associated nuclear (EBNA-1-6)
and membrane (LMP) proteins. The mapping and definition of
EBNA-4 and EBNA-6 will be continued. The work on EBNA-5 will
be focused on the B95-8/Raji prototype negative lines and the
possible existence of alternative specificities. We also intend to
localize the EBNAs vs EA/VCA in the proliferating, compared to
differentiating layers of the epithelium. The intranuclear
distribution of the EBNAs will be studied at the EM level and
compared to other nuclear proteins, such as c-myc, N-myc, cyclin
and sn-RNPs. Proteins of the EBNA family will be affinity
purified with the help of the existing monoclonals. The purified
proteins will be tested for DNA dependent ATPase, and to
poisomerase I and II activities. A modified McKay assay will be
used to search for specific DNA binding sites on EBNA-2 and
EBNA-5. EBNA-1, EBNA-2 and LMP transfected murine tumor
lines will be tested for immunogenicity in syngeneic mice.
Corresponding human transfectants will be tested for CTL-
sensitivity in vitro, transformation associated changes and new
activation markers. Phenotypic studies will be concerned with
possible coordinated regulation of the EBNAs studied in sets of
EBV-converted sublines, derived from the same EBV negative BL
line. "Mirror experiments" will be performed on myc-transfected
LCLs that have shifted to a more BL-like phenotype. In order to
extend the study of phenotypic regulation to other cell types, a
C3d/EBV (CR2) receptor clones will be isolated from a cDNA
library and expressed in various EBV negative cells. Receptor
positive cells will be infected with EBV and the expression of the
transformation vs. lytic cycle associated proteins will be
followed. We shall also study the expression of all seven antigens
in nasopharyngeal carcinoma biopsies.
该项目的目的是继续研究EBV-
编码的生长转化相关核蛋白(EBNA-1-6)
和膜(LMP)蛋白。 的映射和定义
EBNA-4和EBNA-6将继续进行。 EBNA-5的工作将
将重点放在B 95 -8/Raji原型负线和
可能存在替代特性。 我们还打算
与EA/VCA相比,
分化上皮层。 核内
将在EM水平上研究EBNA的分布,
与其他核蛋白如c-myc、N-myc、cyclin
和sn-RNP。 EBNA家族的蛋白质将是亲和的。
在现有单克隆抗体的帮助下纯化。 纯化的
将检测蛋白质的DNA依赖性ATP酶,
异构酶I和II活性。 将采用改良McKay测定法,
用于搜索EBNA-2上的特异性DNA结合位点,
EBNA-5。 EBNA-1、EBNA-2和LMP转染的鼠肿瘤
在同系小鼠中测试细胞系的免疫原性。
将测试相应的人转染子的CTL-1。
体外敏感性、转化相关变化和新
激活标记。 表型研究将关注
可能的协调监管的EBNA研究在套
EBV转化的亚系,来源于相同的EBV阴性BL
线 “镜像实验”将在myc转染的
LCL已转变为更类似BL的表型。 为了
将表型调控的研究扩展到其他细胞类型,
C3 d/EBV(CR2)受体克隆将从cDNA中分离
并在各种EBV阴性细胞中表达。 受体
阳性细胞将被EBV感染,
转化与裂解周期相关的蛋白质将是
跟踪了 我们还将研究所有七种抗原的表达
在鼻咽癌活检中。
项目成果
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专著数量(0)
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