CHARACTERIZATION OF THE ARF FAMILY OF REGULATORY GTP-BINDING PROTEINS

GTP 调节蛋白 ARF 家族的表征

基本信息

  • 批准号:
    5201246
  • 负责人:
  • 金额:
    --
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

This project involves studies of the structures, functions and mechanisms of action of members of the superfamily of regulatory GTP binding proteins; particularly the members of the ADP-ribosylation factor (ARF) family. ARF has been shown to have essential functions in the maintenance of the integrity and proper functioning of the endoplasmic reticulum, Golgi complex, and endosome compartments. ARF proteins also stimulate phospholipase D, likely serving as the direct activators of this effector. There are currently 6 mammalian ARF proteins and 6 mammalian ARF-like proteins fully cloned and sequenced. The cloning and sequencing of novel members of this family has slowed to allow more time to analyze functions of the known members. We have utilized a number of functional screens in yeast to provide new clues to the actions of ARF proteins in eukaryotes. These screens have included suppressor analysis, a conditional lethal screen of ARF1, and two-hybrid screening to identify other components in ARF signaling pathways. Each of these approaches have led to the cloning of human and yeast genes whose products interact with Arf proteins. Results of these analysis are likely to open up new areas of research into this increasingly important family of cellular regulators. The three dimensional crystal structure of ARF GDP has been solved. Work continues on the active, ARF GTP and myristoylated ARF structures as each should aid in the determination of critical functional domains and design of specific inhibitors of different Arf activities.
该项目涉及结构、功能和机制的研究 调节 GTP 结合超家族成员的作用 蛋白质;特别是 ADP-核糖基化因子 (ARF) 的成员 家庭。 ARF 已被证明在以下方面具有重要功能: 维持内质的完整性和正常功能 网状结构、高尔基复合体和内体区室。 ARF 蛋白也 刺激磷脂酶 D,可能作为直接激活剂 这个效应器。 目前有6种哺乳动物ARF蛋白和6种哺乳动物ARF样蛋白 蛋白质已完全克隆并测序。 小说的克隆和测序 这个家族的成员已经放慢了速度,以便有更多的时间来分析函数 已知成员中。 我们使用了许多功能屏幕 酵母中 ARF 蛋白的作用提供新线索 真核生物。 这些屏幕包括抑制器分析、 ARF1 的条件致死筛选和双杂交筛选以鉴定 ARF 信号通路中的其他成分。 这些方法中的每一个 导致人类和酵母基因的克隆,其产物相互作用 与 Arf 蛋白。 这些分析的结果可能会开辟新的领域 这个日益重要的细胞家族的研究领域 监管机构。 ARF GDP的三维晶体结构已得到解决。 工作 继续研究活性 ARF GTP 和肉豆蔻酰化 ARF 结构 应有助于确定关键功能域和设计 不同 Arf 活性的特异性抑制剂。

项目成果

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