A DNA origami platform for measuring membrane protein interactions

用于测量膜蛋白相互作用的 DNA 折纸平台

基本信息

  • 批准号:
    10301370
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 20.61万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    2020
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    2020-11-12 至 2022-10-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Project Summary/Abstract Cell membranes are populated with proteins whose interactions are important for myriad cellular functions, from metabolism to signaling, including many functions implicated in processes such as neurodegeneration. Membrane proteins are notoriously difficult to handle and study. For many membrane proteins it is unknown whether they exist singly (as monomers), in pairs (as dimers), or larger collections (higher oligomers). A method to determine the number and arrangement of subunits in a protein complex within its native lipid membrane environment would resolve a number existing controversies, and would eventually have a large impact human health. One approach to this problem would be to study protein interactions at the single molecule level, which can require expensive and complex instrumentation. Another approach would be to employ a relatively inexpensive, chemically self-assembled “molecular hand” to program the interactions between precisely controlled numbers and ratios of proteins (their “stoichiometry”). Taking the second approach, we propose to develop a general platform for studying protein-protein interactions in lipid membranes, the DNA origami ring-templated liposome. This platform will allow exquisite control and measurement of protein-protein interactions within a single lipid bilayer, and overcome the limitations of existing methods for differentiating monomers from dimers. A DNA origami ring, filled with a disc-shaped liposomal membrane, will be constructed with attachment points for individual proteins of interest. Spaced with nanometer-precision along the edge of the ring, these attachment points will be used to define the number and type of protein subunits that can enter the membrane. Programmed release of the proteins into the membrane will be achieved through the introduction of DNA signals, that break DNA linkers between the proteins and the edge of the DNA ring. In our first aim, we will prototype and troubleshoot the platform by studying the interactions of fluorescently labelled DNA test molecules in a number of control experiments. In a second aim, we will replace the DNA test molecules with proteins having a known interaction, and verify that the platform can be used to measure protein-protein interactions. In a final aim, we will focus on resolving a long-standing question regarding the dimerization of a SNARE complex protein Synaptobrevin 2, which is an important participant in the membrane fusion process required for the release of neurotransmitters.
项目总结/摘要 细胞膜上充满了蛋白质,这些蛋白质的相互作用对无数细胞的生长至关重要。 功能,从代谢到信号传导,包括参与过程的许多功能, 神经退化众所周知,膜蛋白质很难处理和研究。对于许多 膜蛋白,它们是否单独存在(作为单体),成对存在(作为二聚体), 或更大的集合(更高的低聚物)。一种确定多个 蛋白质复合物中的亚基在其天然脂质膜环境中将分解 目前存在的一些争议,并最终会对人类健康产生很大的影响。一 解决这个问题的方法是在单分子水平上研究蛋白质相互作用, 可能需要昂贵且复杂的仪器。另一种方法是使用 相对便宜的,化学自组装的“分子手”来编程相互作用 精确控制蛋白质的数量和比例(它们的“化学计量”)之间的关系。以 第二种方法,我们建议开发一个研究蛋白质-蛋白质的通用平台 脂质膜中的相互作用,DNA折纸环模板脂质体。这个平台将 允许精确控制和测量单个脂质内的蛋白质-蛋白质相互作用 双层,并克服了现有方法的局限性,用于区分单体, 二聚体。将构建一个充满圆盘状脂质体膜的DNA折纸环 具有用于感兴趣的单个蛋白质的附着点。沿着以纳米精度间隔 环的边缘,这些附着点将用于定义蛋白质的数量和类型 可以进入细胞膜的亚基。蛋白质程序性释放到膜中 将通过引入DNA信号来实现,该信号打破了DNA连接器之间的DNA连接器。 蛋白质和DNA环的边缘。在我们的第一个目标,我们将原型和故障排除 通过研究荧光标记的DNA测试分子在许多环境中的相互作用, 对照实验在第二个目标中,我们将用蛋白质取代DNA测试分子, 一个已知的相互作用,并验证该平台可用于测量蛋白质-蛋白质 交互.最后,我们将集中精力解决一个长期存在的问题, SNARE复合蛋白Synaptobrevin 2的二聚化,这是一个重要的参与者, 释放神经递质所需的膜融合过程。

项目成果

期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

Paul W.K. Rothemund其他文献

Paul W.K. Rothemund的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('Paul W.K. Rothemund', 18)}}的其他基金

Asymmetric DNA Shapes for Orienting Molecular Components within Hybrid Nanodevices
用于定向混合纳米器件中分子成分的不对称 DNA 形状
  • 批准号:
    1636364
  • 财政年份:
    2016
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
    Standard Grant
EMT/NANO: Integration of DNA nanotechnology with nanoelectronics
EMT/NANO:DNA 纳米技术与纳米电子学的集成
  • 批准号:
    0829951
  • 财政年份:
    2008
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
    Continuing Grant

相似海外基金

FORTIFY - From Molecular Physiology to Biophysics of the Glymphatic System: a Regulatory Role for Aquaporin-4
FORTIFY - 从类淋巴系统的分子生理学到生物物理学:Aquaporin-4 的调节作用
  • 批准号:
    EP/Y023684/1
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
    Research Grant
The Biophysics of Mesoscale, Reversible, Biomolecular Assemblies
中尺度可逆生物分子组装的生物物理学
  • 批准号:
    EP/Y000501/1
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
    Fellowship
Biophysics of the brain’s waste disposal system: Understanding why we sleep
大脑废物处理系统的生物物理学:了解我们为什么睡觉
  • 批准号:
    DP230101113
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
    Discovery Projects
CAREER: Surfactant Proteins that Stabilize Biomolecular Condensates: From Biophysics to Biomaterials for Biomanufacturing
职业:稳定生物分子缩合物的表面活性剂蛋白:从生物物理学到生物制造的生物材料
  • 批准号:
    2238914
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
    Continuing Grant
Predoctoral Program in Biophysics
生物物理学博士前课程
  • 批准号:
    10628233
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
Biophysics of liquid droplets in bacteria
细菌中液滴的生物物理学
  • 批准号:
    2887560
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
    Studentship
REU Site: A Summer Research Experience in Structural and Computational Biology and Biophysics
REU 网站:结构与计算生物学和生物物理学的夏季研究经历
  • 批准号:
    2150396
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
    Continuing Grant
Biophysics Training Program
生物物理学培训计划
  • 批准号:
    10494714
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
Targeted Infusion Project: Creation of a Biophysics minor program for STEM success
有针对性的输液项目:为 STEM 成功创建生物物理学辅修课程
  • 批准号:
    2306506
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
    Standard Grant
Center: REU Site: Interdisciplinary Research Opportunities in Biophysics
中心:REU 地点:生物物理学的跨学科研究机会
  • 批准号:
    2242779
  • 财政年份:
    2023
  • 资助金额:
    $ 20.61万
  • 项目类别:
    Standard Grant
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了