Mécanismes moléculaires et cellulaires de désensibilisation du récepteur opioïde delta

阿片受体脱敏分子和细胞机制

• 批准号: 341398-2007
• 负责人: Gendron, Louis
• 金额: $ 1.95万
• 依托单位: Université de Sherbrooke
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Discovery Grants Program - Individual
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2007-01-01 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=361706
• 关键词: canismes; mol; culaires; et; cellulaires

Comme c'est le cas pour la majorité des récepteurs couplés aux protéines G, in vitro le récepteur opioïde delta (DOR) est rapidement désensibilisé suite à son activation. Avec ce programme de recherche, nous avons comme objectif général d'élucider les mécanismes de désensibilisation de DOR in vivo. Nous émettons l'hypothèse qu'en fonction de leur(s) rôle(s), diverses populations de neurones réagissent différemment à des stimulations répétées avec des agonistes sélectifs delta. Objectif 1. Distribution des neurones développant une tolérance aux agonistes delta. Nous étudierons la distribution des cellules de la moelle épinière et des ganglions spinaux (DRG) qui développent une diminution de responsivité à la deltorphine suite à des stimulations répétées de DOR. Nous proposons donc de comparer chez des animaux pré-injectés ou non avec la deltorphine : 2.1 les propriétés d'internalisation de DOR à l'aide d'une technique d'internalisation in vivo d'un ligand fluorescent sélectif; 2.2 son couplage aux protéines G par liaison au [35S]GTPgammaS; 2.3 ses fonctions signalétiques en mesurant l'activation de la voie de signalisation ERK1/2; puis les changements possibles dans les niveaux d'expression du récepteur (ARNm et protéine) à l'aide d'études d'hybridation in situ et de liaison. Objectif 2. Mécanismes impliqués dans la désensibilisation de DOR. In vitro, après stimulation par un agoniste, le résidu Ser363 dans la portion C-terminale de DOR est le premier résidu à être phosphorylé. Après le recrutement des beta-arrestines, DOR emprunte presque exclusivement la voie de dégradation. In vivo, vu l'absence de tolérance antihyperalgésique, il est possible que la régulation de DOR se fasse de façon différentielle selon les populations de neurones observées (e.g. DRG versus moelle épinière). Nous évaluerons : 1.1 les niveaux de désensibilisation de DOR en mesurant la phosphorylation sur le résidu Ser363, en particulier dans la moelle lombaire et dans les DRG, à l'aide des techniques d'immunoblot et d'immunohistochimie (anti-phosphoDOR-Ser363); 1.2 les voies qu'emprunte DOR après son internalisation; puis 1.3 les niveaux de récepteurs destinés à la dégradation en mesurant l'ubiquitinylation de DOR.

在体外实验中，我们发现了一种新的激活方法，即快速激活的方法。在活体内，我们的研究计划和我们的目标是一致的，这是一种新的方法。L(S)的假设(S)，分散了神经元研究的不同群体，刺激了S三角洲的兴奋。目的1.神经元发育过程中神经元的分布。Nousétudierons la Distributed des Cellules de la Moelleépinière et des Ganglions Spinaux(DRG)Qui déDevelopment pune Increution de Responsivitéàla Deltorphine Suite And Responsivitéàla Deltorphine Suiteàdes Exhibitions Répétées de Dor.[35]GTP Gammas[35]GTP Gamma[35]GTP Gammas[35]GTP[35]，2.3Ses Functions de Sunctionétitique‘Sunctionétititiquiétitiques en’Actions de Vie de Voie de Signi‘Sigutions ERK1/2；PIIS LES LES CHAINICATIONICATIONES目标2.S的隐含意义在于使之更加敏感。在体外，阿普雷S刺激Par un激动剂，Le Résidu Ser363 Dans la Part C-Terminale de Dor Est le Premieri résiduàiltre Phriciylé。《中国日报》报道：《中国日报》在体内，VU L的缺乏抗高血压，一个可能的QUE la régation de Dor se Fasse de Fasçon Différentielle selon les Popular de Neurons Observées(例如，背根神经节与神经元组)。现价：1.1Les niveaux de déSensibilization de DOR en Meururant la磷酸化Sur le résidu Ser363，en Special dans la moelle lombaire et dans les DRG，Ana L‘aides Technologies d’免疫印迹et d‘d’免疫组化(抗磷脂-DOR-Ser363)；1.2les voies Qu‘emprunte DOR aprèS son内化；puis 1.3 le niveaux de récepteers destinélangélla dégrading en Meururant L’泛素化DOR-DOR。